外植体接种与培养.pptVIP

第四章 外植体的接种和培养 第一节 外植体的接种 第二节 培养方法 第三节 培养条件 第四节 外植体褐变及防止 第五节 试管苗的玻璃化现象及其预防措施 第一节 外植体的接种 一．接种室和净化工作台的消毒 二．外植体的接种 一．接种室和净化工作台消毒 1．紫外灯照射20分钟； 2．70%酒精喷雾空气； 3．台面酒精棉球擦洗； 二．外植体的接种 1．接种工具要经常在酒精灯上烧，防止交叉感染； 2．烧后的接种工具要放冷却后才能用； 3．操作不能离超净台边缘太近，也不能太远； 4．外植体应按照要求在培养基的表面或内部放好，不能让其在器皿中活动； 5．包扎器皿应在操作台面上进行，动作要轻，包扎好后才能从台面上移走。 6．接种时禁止谈话，防止咳嗽。 第二节 培养方法 一．固体培养 二．液体培养 一．固体培养 固体培养最常用的凝固剂是琼脂，使用浓度为0.6-1.0%（重量/体积）。固体培养的最大优点是简单、方便。但缺点是1）只有外植体的底部表面才能接触培养基，吸收营养，上面则不能，影响生长速度；2）外植体插入培养基后，气体交换不畅，排泄的有害物质积累，造成毒害；3）组织受光不均匀，细胞群生长不一致。 二．液体培养 静止滤纸桥培养 震荡培养。 静止滤纸桥培养 这种方法主要用于胚培养和愈伤组织培养等，目前此