食品卫生微洗生物指标及微生物检测.pptVIP

食品卫生微生物学指标; 食品卫生标准;;食品卫生标准中的微生物指标;菌落总数所指示的食品卫生意义 ：;1.2菌落总数的常规检验方法;培养温度一般为37℃（水产品的培养温度，由于其生活环境水温较低，故多采用30℃） 培养时间一般为48h，有些方法只要求24h的培养即可计数 培养箱应保持一定的湿度，琼脂平板培养48h后，培养基失重不应超过15％ 在某些场合，为了防止食品颗粒与菌落混淆不清，可在营养琼脂中加入氯化三苯四氮唑（TTC），培养后菌落呈红色，易于分别 ;;; ;选取菌落数在30 CFU～300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU 的平板记录具体菌落数，大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。 其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。;若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。 若所有稀释度的平板菌落数均小于30 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1 乘以最低稀释倍数计算。 若所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU～300 CFU 之间，其中一部分小于30 CFU 或大于300CFU 时，则以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。;菌落总数的计算方法;菌落总数的报告;平板计数琼脂（plate count agar，PCA）培养基;方法优点;菌落总数的其它检验方法 ;涂布平板法;;;涂布法优缺点;点滴平板法;螺旋平板仪;粪便污染指示菌类;大肠菌群;在一定培养条件下能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。;大肠菌群数量的表示方法有两种：1）大肠菌群MPN????大肠菌群MPN是采用一定的方法，应用统计学的原理所测定和计算出的一种最近似数值；2）大肠菌群值。????大肠菌群值是指在食品中检出一个大肠菌群细菌时所需要的最少样品量。故大肠菌群值越大，表示食品中所含的大肠菌群细菌的数量越少，食品的卫生质量也就越好：在这两种表示方法中，目前国内外普遍采用大肠菌群MPN，而大肠菌群值逐渐趋于不用。;大肠菌群值MPN;样品稀释 初发酵试验 复发酵试验;不产气;;;样品稀释 平板计数 证实试验;图 大 肠 菌 群 平 板 计 数 法 检 验 程 序;选取菌落数在15 CFU～150 CFU 之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。 典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环，菌落直径为0.5 mm 或更大。;大肠菌群在VRBA上的菌落特征;证实试验 从VRBA 平板上挑取10 个不同类型的典型和可疑菌落，分别移种于BGLB 肉汤管内，36 ℃±1 ℃ 培养24 h～48 h，观察产气情况。凡BGLB 肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。;大肠菌群平板计数的报告 经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以计数的平板菌落数，再乘以稀释倍数，即为每g（mL）样品中大肠菌群数。例：10-4样品稀释液1 mL，在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落，挑取其中10个接种BGLB肉汤管，证实有6个阳性管，则该样品的大肠菌群数为：100×6/10×104/g（mL）=6.0×105CFU/g（mL）。;粪便污染指示菌之二------粪大肠菌群（faecal coliforms）或耐热大肠菌群;粪大肠菌群（faecal coliforms）或耐热大肠菌群;粪便污染指示菌之三-------大肠杆菌;大肠杆菌指革兰氏阴性无芽孢杆菌、乳糖发酵产酸产气、IMViC试验（靛基质、MR、V-P、柠檬酸盐试验）为++--或-+--的细菌。 与人类有关的大肠杆菌统称为致泻性大肠杆菌，包括五种：肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）、黏附性大肠杆菌（EAEC）。;;;检 样 ;黑色菌落移种营养琼脂斜面;;;;菌落总数和大肠菌群MPN的其他测定方法;膜过滤法;膜过滤;膜过滤测定微生物数;TTC（2、3、5、—氯化三苯四氮唑）显色法;;酵母菌在TTC上的菌落特征 ;DC(去氧胆酸钠)半固体法;;;;;粪便污染指示菌之四-------肠球菌（Enterococcus）;肠球菌分类;自然界分布广，存活力持久 肠球菌普遍存在于自然界，一般栖居在各种温血和冷