第十二章-骨代谢异常的生物化学诊断.pptVIP

谢　谢！ 一、钙、磷、镁检查 血清总钙（TCa2+）的测定 滴定法（氧化还原滴定法、络合滴定法） 比色法 邻甲酚酞络合酮法 WHO和我国推荐的常规方法 甲基麝香草酚蓝法 偶氮胂Ⅲ法 火焰光度法 原子吸收分光光度法 IFCC推荐的参考方法 同位素稀释质谱法 IFCC推荐的决定性方法 返回节 血清游离（离子）钙测定 生物学法 透析法 超滤法 金属指示剂法 离子选择性电极法(ISE) 目前应用最多，此方法简便、快速、重复性好，正确和敏感性高，已成为钙离子测定的参考方法。 返回节 血清磷测定 磷钼酸还原法 我国推荐的常规方法 非还原法 染料结合法 紫外分光光度法 黄嘌呤氧化酶比色测定法 WHO推荐的常规方法 CV—多元络合超微量测定法 同位素稀释质谱法 决定性方法 原子吸收分光光度法等　 返回节 血清镁测定 比色法 我国推荐MTB法钙镁试剂法作为常规方法　 荧光法 离子层析法 离子选择性电极法(ISE) 酶法 原子吸收分光光度法(AAS) 参考方法 同位素稀释质谱法(ID-MS)等 决定性方法 返回节 血清镁测定 钙镁试剂是一种金属色原指示剂，在碱性溶液中 与镁结合形成紫色复合物检测。 加入钙螯合剂EGTA可减少钙的干扰，减少蛋白质 及血脂的干扰。 甲基麝香草酚蓝法：MTB与镁形成兰色复合物， 加入EGTA可减少钙的干扰。 返回节 血清镁测定(酶法) 葡萄糖激酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶偶联法。 己糖激酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶偶联法。 磷酸葡萄糖变位酶和6磷酸葡萄糖脱氢酶偶联法。 异柠檬酸脱氢酶法。 甘油激酶作用下生成甘油氧化酶和过氧化物酶 偶联法。 血清镁测定(化学发光法 ) 返回节 二、调节激素测定 甲状旁腺激素测定 放射免疫法 酶联免疫法 免疫化学发光法 ELISA法是新近发展起来的方法，具有快速、灵敏、无同位素污染的优点, 该法最小检测量为2pg／ml，批内及批间CV分别为2.7％～2.9％和7.9％～8.6％。回收率为93％～94％。 返回节 1,25- (OH)2-D3的测定 放射竞争性结合法（CPB） 放射受体测定法（RRA） 放射免疫法（RIA） 高效液相色谱法（HPLC） 由于1,25- (OH)2-D3是血清中维生素D的主要 活性形式,故是反映维生素D状况的最佳指标。 返回节 血清降钙素测定 RIA法 结果受不同来源抗血清灵敏度和特异性不同，不同方法和试剂盒间差异较大，使临床正常水平在实验室之间难以统一。 两点免疫法（EIA和IRMA），测出正常人降钙素的基础水平低于10 ng/L～20ng/L，其检出限可小于2ng/L。 两点法在诊断甲状腺髓样癌（medullary thyroid carcinoma MIC）要比大多数竞争性RIA显现出良好的灵敏度和特异性。 返回节 甲状旁腺相关蛋白测定 竞争性免疫法 固定抗PTHrP抗体的亲和色谱法反相色谱法 返回节 更敏感和特异的两点法或IRMA法的检出限可达0.1～1.0 pmol/L。 三、骨代谢标志物测定 骨钙素测定 放射免疫法 双位免疫放射法 酶联免疫法 亲和素-生物素酶免疫测定法(BAEIA) 化学发光免疫分析法(CLIA) 免疫荧光分析法(FIA)等 目前应用最多的是RIA法和ELISA法 返回节 骨性碱性磷酸酶测定 先识别或分离出BALP，再测定其碱性磷酸酶的活性。目前最好的方法是用免疫放射法(IRMA)测定BALP。 IRMA法定量检测骨ALP可作为筛选试验，高值标本须用电泳法证实除去肝ALP干扰，检测骨ALP过低标本时，以电泳法为首选。 近来建立了对BALP特异性很强的单克隆抗体的免疫分析法，具有高度的特异性和敏感性，而且操作简便，被认为是目前鉴别和定量分析BALP的最佳方法。 返回节 返回章 返回节 吡啶酚和脱氧吡啶酚测定 HPLC法：用HPLC-荧光检测法测定。 免疫法：用等分子交叉反应法检测吡啶酚。 竞争性单克隆抗体ELISA法测定脱氧吡啶酚。 C-端肽和N-端肽测定 ELISA法 耐酒石酸酸性磷酸酶测定 免疫法 尿半乳糖羟赖氨酸测定 反相HPLC法分离，荧光法 羟脯氨酸测定 离子交换色谱反相HPLC法。 退出 　第二节　钙和磷代谢紊乱 一、钙代谢异常 二、磷代谢异常 返回章 一、钙代谢异常 低钙血症血钙小于2.25mmol/L以上.其病因: 低清蛋白血症 血清总钙降低，但直接检测游离钙 多正常。 慢性肾功能衰竭 使1,25-(OH