荧光光谱分析法-课件.ppt

2008年诺贝尔化学奖 green-fluorescent protein (GFP) 电子能级的多重性 M=2S+1 激发态→基态的能量传递途径√ 激发光谱与发射光谱的关系√ 二、荧光的产生与分子结构的关系 relation between fluorescence and molecular structure 2.有机化合物的分子结构与荧光的关系√ √三、影响荧光强度的因素 relation between fluorescence and molecular structure 4.内滤光作用和自吸现象 5.荧光熄灭剂 第二节 荧光定量分析方法 一、荧光强度与物质浓度的关系 I0 I F (荧光定量分析法的依据) 结论：荧光强度和溶液浓度呈线性关系，只限于极稀的溶液(A0.05)。对于较浓溶液，会产生自熄灭现象。 二、定量分析方法 优点 1.灵敏度高 比紫外-可见分光光度法高2～4个数量级； 检测下限：0.1～0.001?g/mL 2.选择性强 既可依据发射光谱特征，又可根据激发光谱特征； 3.试样量少和方法简单 缺点 应用范围小 1.校正曲线法 C F 校正曲线 CX FX 步骤： 1.配制不同浓度的标准 溶液 2.做F～C关系曲线 3.求得浓度 注意：固定仪器和测定条件；