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全血基因组DNA的提取;分子生物学检验技术;以超乎想象的速度飞速发展,渗透到医学每一个领域。;分子生物学检验技术的应用;本学期实验内容;实验一 全血基因组DNA的提取; 真核基因组DNA的分离纯化 ;核酸提取的主要步骤:;一、实验目的与意义;(三)常用提取方法:
有机溶剂抽提法(氯仿-异戊醇法)
盐析法(经典Miller盐析法)
NaI法
……;二、实验原理;1、高速离心机。
2、全血DNA提取试剂盒(TaKaRa宝生物工程公司)
试剂盒组成: GenTLE solution Ⅰ 1瓶
GenTLE solution Ⅱ 2瓶
GenTLE solution Ⅲ 1瓶
3、异丙醇、70%乙醇。
;各试剂成分作用: ;四、实验流程与要求;全血DNA的提取;(4);室温12,000rpm离心5min;提取DNA质量的初鉴;凝胶电泳操作注意事项;5. 电泳系统的变化会影响DNA的迁移,加入DNA标准参照物进行判定是必要的。
6. DNA样品中盐浓度会影响DNA的迁移率,平行对照样品应使用同样的缓冲条件以消除这种影响。
7. DNA迁移率取决于琼脂糖凝胶的浓度,迁移分子的形状及大小。采用不同浓度的凝胶有可能分辨范围广泛的DNA分子,制备琼脂糖凝胶可根据DNA分子的范围来决定凝胶的浓度。小片段的DNA电泳应采用聚丙烯酰胺凝胶电泳以提高分辨率。
;五、实验结果;谢谢!
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