《GBT14965-1994-食物中氨基酸的测定方法》.pdfVIP

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GB/T 14965—1994 中华人民共和国国家标准 食物中氨基酸的测定方法 Method for determination of amino acids in foods GB/T 14965—1994 1 主题内容与适用范围 本标准规定了用氨基酸自动分析仪测定食物中氨基酸的方法。 本标准适用于食物中天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨 酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨 酸、赖氨酸和精氨酸等十六种氨基酸的测定。其最低检出限为 10pmol。 本标准不适用于蛋白质含量低的水果、蔬菜、饮料和淀粉类食物的氨基酸 测定。 2 原理 食物蛋白质经盐酸水解成为游离氨基酸,经氨基酸分析仪的离子交换柱分 离后,与茚三酮溶液产生颜色反应,再通过分光光度计比色测定氨基酸含量。 3 试剂 全部试剂除注明外均为分析纯,实验用水为去离子水。 3.1 浓盐酸:优级纯。 3.2 6mol/L 盐酸:浓盐酸(3.1)与 1:1 混合而成。 3.3 苯酚:须重蒸馏。 3.4 混合氨基酸标准液(仪器制造公司出售):0.002 50mol/L。 3.5 缓冲液 3.5.1 pH2.2 的柠檬酸钠缓冲液:称取 19.6g 柠檬酸钠 (Na C H O ·2H O ) 3 6 5 7 2 和 16.5mL 浓盐酸加水稀释到 1 000mL,用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 2.2。 3.5.2 pH3.3 的柠檬酸钠缓冲液:称取 19.6g 柠檬酸钠和 12mL 浓盐酸加水稀 释到 1 000mL,用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 3.3。 3.5.3 pH4.0 的柠檬酸纳缓冲液:称取 19.6g 柠檬酸钠和 9mL 浓盐酸加水稀 释到 1 000mL,用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节至 4.0。 3.5.4 pH6.4 的柠檬酸纳缓冲液:称取 19.6g 柠檬酸钠和 46.8g 氯化钠(优 级纯)279mL,加水稀释到 1 000mL,用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 6.4。 3.6 茚三酮溶液 O)168g,加入冰乙酸 3.6.1 pH5.2 的乙酸锂溶液:称取氢氧化锂 (LiOH·H 2 (优级纯)279mL,加水稀释至1 000mL,用浓盐酸或 50%的氢氧化钠溶液调节 pH 至 5.2。 3.6.2 茚三酮溶液:取 150mL 二甲基亚砜 (C H OS )的乙酸锂溶液 (3.6.1) 2 6 50mL 加入 4g 水合茚三酮(C H O ·H O )和 0.12g 还原茚三酮(C H O ·2H O ) 9 4 3 2 18 10 6 2 搅拌至完全溶解。 3.7 高纯氮气:纯度 99.99%。 3.8 冷冻剂:市售食盐与冰按 1:3 混合。 中华人民共和国卫生部中华人民共和国卫生部 1994—03—181994—03—18 批准 199批准 1994—09—014—09—01 实施 实施 GB/T 14965—1994 4 仪器和设备 4.1 真空泵。 4.2 恒温干燥箱。 4.3 水解管:耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管,体积 20~30mL。用

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