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专题二 微生物的培养 无菌技术 无菌技术 无菌技术 无菌技术 无菌技术 无菌技术 基本操作程序 1、培养基的配制 1、培养基的配制 1、培养基的配制 2、倒平板技术 2、倒平板技术 3、微生物的接种技术 3、微生物的接种技术 3、微生物的接种技术 4、微生物的恒温培养 4、微生物的恒温培养 4、微生物的恒温培养 5、菌种的保存 实践:分离土壤中的细菌 实践:分离土壤中的细菌 实践:分离土壤中的细菌 实践:分离土壤中的细菌 实践:分离土壤中的细菌 实践:分离土壤中的细菌 实践1:分离土壤中的细菌 实践2:分离土壤中的分解尿素的细菌 实践2:分离土壤中的分解尿素的细菌 实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目 实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目 实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目 实践3:分离并计算土壤中的分解尿素的细菌的数目 1、如何对细菌进行计数？ 1、如何对细菌进行计数？ 2006-06-02 生物选修1《生物技术实践》 2006-06-02 消毒与灭菌的区别？ 单链季胺盐、双胍类、中草药、金属离子 杀灭细菌繁殖体、亲脂病毒 低效消毒法 超声波、碘类、醇类、酚类 杀灭除芽孢外的致病微生物 中效消毒法 紫外线、含氯剂、臭氧、复配剂等 杀灭一切致病微生物 高效消毒法 物理法：热力、辐射、微波、等离子体 化学法：醛类、烷化剂 杀灭一切微生物 灭菌法 方法 定义 分类 消毒的方法： 1、100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min 3、用75%酒精、新洁尔灭等进行皮肤消毒 4、氯气消毒水源 5、紫外线消毒 …… 灭菌的方法： 1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min. 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 而平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 固体培养基 液体培养基 天然培养基 合成培养基 基础培养基 加富培养基 鉴别培养基 选择培养基 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 牛肉膏蛋白胨培养基（用于培养细菌） 1．称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．过滤：这一步可以省去。 5．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。 6．加塞 7．包扎 8．灭菌 9．倒平板 10．无菌检查：将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2、长期保存：甘油冷冻管藏法 1、由土壤浸出液中提取细菌。 2、有哪些注意事项？ 3、如何判断土壤中有哪些种类的细菌？ 菌落的特征？ 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 关注菌落的形态、大小、边缘、突起、颜色、质地等等，都是区分细菌的重要手段。 1、培养基的选择？ 1、培养基的选择？ 构建怎样的选择培养基呢？ 附：鉴别培养基：伊红—美蓝培养基是鉴别培养基，可以用来检测自来水中的大肠杆菌是否超标，因为大肠杆菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈深紫色并带有金属光泽，使大肠杆菌的菌落显示出来，并没有促进大肠杆菌的生长和抑制其他微生物的生长。 1、如何对细菌进行计数？ 2006-06-02