第10章 吸光光度法..pptVIP

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一、光的基本性质 光的波粒二象性 二、可见光与溶液的颜色(物质对光的吸收) 单色光、复合光、光的互补 物质吸收光的本质 吸光度 A与透光度T Absorbance and transmittance 吸光系数 和摩尔吸光系数 吸光系数 a 吸光度的加合性 一、光度分析法的几种类型 2、光电比色法 二、分光光度计及其基本部件 单波长单光束分光光度计 单波长双光束分光光度计 吸收光谱(光吸收曲线 ) 吸收光谱的讨论: 吸收定律与吸收光谱的关系 第3节 显色反应及其影响因素 1、酸度的选择 酸度的选择 2、显色剂的用量 3、温度的选择 参比液的选择 二、 吸光光度分析的方法 1、非单色光引起的对吸光定律的偏离 2、吸光质点间相互作用引起的对吸光定律的偏离 例,聚合引起的对吸光定律的偏离 化学反应的影响 示差吸光光度法 2、示差法的误差 例题 示差法提高准确度的实质 双波长分光光度法 双波长分光光度法 选择波长组合λ1 、λ2的基本要求: 络合物的组成的测定 等摩尔连续变化法(Job)测络合比 1、能够分辨两个或两个以上严重重叠的吸收峰 2、能够分辨吸光度随波长急剧上升处所掩盖的弱吸收峰 3、能够确认宽阔吸收带的最大吸收波长 导数光谱谱带比原吸收光谱窄,减少了与干扰谱带交迭的可能性,提高了抗干扰能力。 导数光谱可去除背景干扰,提高分别率。 导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面,显示了很大的优越性。 导数分光光度法 定量分析的理论基础: 1、峰-谷法 2、基线法 3、峰-零法 测量导数光谱峰值的方法: 第六节 吸光光度法的应用 一、痕量金属分析 二、临床分析 三、食品分析 四、其他应用 弱酸和弱碱解离常数的测定 设某波长下,HB和B-都有吸收,b=1cm,根据吸光度的加和性: 在高酸度时,弱酸几乎以HB形式存在: 在强碱性时,弱酸几乎以B-形式存在: ∴ 摩尔比法测络合比(饱和法) M + nR = MRn CM, 固定; CR, 从 0 开始增大 在特定波长测定 ?R = 0, ?M = 0, ?MRn 0 A CR/CM n ?R 0, ?M 0, ?MRn =0 A CR/CM n M + nR = MRn CM+ CR = 常数 CM / C 从 0 →1 在特定波长测定 ?R = 0, ?M = 0, ?MRn 0 0 0.5 1.0 A CM / C 0.33 n = 1, CM / C =0.5 n = 2, CM / C =0.33 0 0.5 1.0 A CM / C ?R 0, ?M 0, ?MRn =0 填空 1、苯酚在水溶液中摩尔吸收系数ε为6.17×103moL/L,若要求使用1cm吸收池时的透光度为0.15~0.65,则苯酚的浓 度应控制在 2、多组分分光光度法可用解联立方程的方法求得各组分的含量,这是基于 3、在紫外可见分光光度计中,在可见光区使用的光源是 灯;用的棱镜和比色皿的材质可以是 ;而在紫外光区使用的光源是 ;用的棱镜和比色皿的材质一定是 1、在符合朗伯—比尔定律的范围内,有色物的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是 A.增加,增加,增加; B. 减小,不变;减小; C. 减小,增加,增加; D. 增加,不变;减小 2、下列说法正确的是 A.透光率与浓度成直线关系; B. 摩尔吸收系数随波长而改变; C.比色法测定FeSCN2+时,选用红色滤光片 ; D. 玻璃棱镜适用于紫外光区 选择 3、测定纯金属钴中锰时,在酸性溶液中以KI04氧化Mn2+成MnO4-以分光光度法测定。其参比溶液为 A.蒸馏水; B.含KI04的试样溶液; C. KI04溶液; D. 不含KI04的试样溶液 5、用普通分光光度法测得标液cl的透光度为20%, 试液的透光度为12%;若以示差分光光度法测定,以 cl为参比,则试液的透光度为 A.40%; B.50%; C.60%; D.70% 4、光度分析中,在某浓度以1.0cm吸收池测得透光度为T。若

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