基于cdd基因敲除和嘧啶操纵子转移的胞苷产生菌-天津科技大学学报.PDF

第 25 卷 第 5 期 天津科技大学学报 Vol.25 No. 5 2010 年 10 月 Journal of Tianjin University of Science Technology Oct. 2010 基于 cdd 基因敲除和嘧啶操纵子转移的 胞苷产生菌的研究 苏 静，邓培生，谢希贤，陈 宁 (工业微生物教育部重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津 300457) 摘 要 ：以大肠杆菌作为出发菌株，通过基因工程手段对其进行改造 ，旨在提高胞苷产量．首先，通过 Red 重组系统敲 除了大肠杆菌 MG3028 基因组上的胞苷脱氨酶基因 (cdd) ，阻断了胞苷的分解代谢．然后，构建了含解淀粉芽孢杆菌 TS8 嘧啶操纵子结构基因的重组质粒 pPYR3021 ，并将其转入 E.coli MG3028 (△cdd)．与出发菌株 E.coli MG3028 相 比，E.coli MG3028 (△cdd)的胞苷产量提高了近 2 倍，而尿苷产量降低了近 75%，携带重组质粒 pPYR3021 的菌株胞 产量较出发菌株提高了近 6 倍． 关键词 ：大肠杆菌；胞苷脱氨酶；嘧啶操纵子；Red 重组；胞苷 中图分类号：Q784 文献标志码 ：A 文章编号 ：1672-6510 (2010)05-0001-05 Study on Cytidine Producing Strain Based on cdd Gene Knockout and Pyrimidine Operon Transfer SU Jing ，DENG Pei-sheng ，XIE Xi-xian ，CHEN Ning (Key Laboratory of Industrial Microbiology ，Ministry of Education ，College of Biotechnology ， Tianjin University of Science Technology ，Tianjin 300457 ，China) Abstract ：To enhance production of cytidine ，Escherichia coli was manipulated by using genetic engineering methods. The cdd gene of Escherichia coli MG3028 was knocked out to block cytidine degradation by Red recombination system. Then the recombinant plasmid pPYR3021 containing pyrimidine operon of Bacillus amyloliquefaciens TS8 was constructed and trans- formed into E.coli MG3028 (△cdd). Compared with original strain MG3028 ，knockout of t