DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体.PDFVIP

中国农学通报 2012,28(17):97-100 Chinese Agricultural Science Bulletin DNA免疫法制备猪圆环病毒Ⅱ型ORF3抗体 谢俊岭，耿美鸽，吴 迪，卻小宁，周双海 （北京农学院动物科学技术学院，北京102206） 摘 要：为了制备猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)开放阅读框3(ORF3)蛋白的抗体，并为ORF3 功能研究奠定基 础，用PCR 方法扩增PCV2 ORF3 基因，对其PCR 产物用EcoR I 与Xho I 进行酶切，并对真核表达载体 pCDNA3.1(+)进行同样酶切，连接2 种目的酶切产物后转化E.coli DH5a 感受态，菌落PCR 和序列测定结 果显示成功构建出重组质粒pCDNA3.1-PCV2 ORF3。将该重组质粒接种BALB/c 小鼠，用间接免疫荧 光(IFA)检测小鼠血清PCV2 ORF3 抗体的特异性及其效价。IFA 结果证实经PCV2 ORF3 重组质粒接种 所制备的小鼠血清是PCV2 ORF3 的特异性抗体，小鼠血清PCV2 ORF3 抗体效价