温度pH激活剂和抑制剂对酶活性的影响-赣南医学院.PDFVIP

Gannan Medical University 温度、pH、激活剂和抑制剂对酶 活性的影响 赣南医学院 生物化学与分子生物学教研室 [目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程； [原理] 1.温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境pH为最适pH 。pH不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。 3.激活剂与抑制剂：激活剂能增加酶的活性，而抑 - 制剂则会抑制酶的活性，Cl 为唾液淀粉酶的激活 剂，而Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。 4. 唾液淀粉酶所催化的反应为： 淀粉→糊精→麦芽糖 碘液显色反应：碘液本身为棕色，与淀粉反应 显深蓝色，与分子量大小不同的糊精呈蓝、紫、红 等色，与麦芽糖不呈色。 [步骤] 收集唾液( 自来水漱口、收集唾液约2-3ml于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A ．温度组 A1管 A2管 A3管 唾液 冰水浴 37 ℃水 沸水浴 （2ml ） 5分钟 浴5分钟 5分钟 1%淀粉 冰水浴 37℃水浴 沸水浴 （1ml ） 15分钟 15分钟 15分钟 1%碘液 2d 2d 2d 2、pH对酶活性的影响 B ．PH值组 B1管 B2管 B3管 磷酸盐缓冲液 PH5.0 PH6.8 PH8.6 （2ml ） 1%淀粉 2ml 2ml 2ml 唾液 10d 10d 10d 摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中 （小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。 3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响 C．激活剂、 C1管 C2管 C3管 C4管 抑制剂组 1%淀粉 1ml 1ml 1ml 1ml 试剂 1%NaCl 1%CuSO 1%Na SO 蒸馏水 （2滴） 4 2 4 唾液 10d 10d 10d 10d 摇匀，每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷盘小池中 （小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时，分别向4 管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。