实训项目十一丁醇异构体混合物的GC分析——归一化法定量.docVIP

实训项目 十一 丁醇异构体混合物的GC分析——归一化法定量 一、实验目的 （1）了解气相色谱仪的基本构造及流程。 （2）掌握气相色谱保留值定性及归一化法定量的方法和特点。 （3）掌握微量注射器进样技术。 （4）了解气相色谱仪氢火焰离子检测器FID的性能和操作方法。 二、实验原理 聚二乙醇是一种常用的具有强极性且带有氢键的固定液，用它制备的PEG-20M色谱柱对醇类有很好的选择性，特别是对四种丁醇异构化合物的分析，在一定的色谱操作条件下，四种丁醇异构化合物可完全分离，而且分析时间短，一般只需4min左右。 三、主要仪器和试剂 1.仪器 GC9790型气相色谱仪（或其他型号气相色谱仪）、气体高压钢瓶（N2、H2与空气，其中空气高压钢瓶可用空气压缩机替代）、氧气减压阀与氢气减压阀、气体净化器、填充色谱柱（PEG-20M，2m×3mm,100～120目）、石墨垫圈、硅胶垫、色谱工作站、样品瓶、电子天平、微量注射器（1μL）。 2.试剂 异丁醇、仲丁醇、叔丁醇、正丁醇（此四种标样均为GC级），样品（含少量上述四种醇，溶剂为水），蒸馏水。 四、操作步骤 1.准备工作 ①测试标样的配制。取一个干燥洁净的样品瓶，吸取3mL水，在分别加入100μL叔丁醇、仲丁醇、异丁醇与正丁醇（GC级），准确称其质量（精确至0.2mg），其质量记为ms1、ms ②测试样的准备。另取一个干燥洁净的样品瓶，加入约3mL丁醇试样，备用。 2.气相色谱仪的开机及参数设置 启动气相色谱仪，按照仪器规定操作要求进行调试，，将色谱仪调至所需工作状态。 色谱条件：柱温90℃；汽化室温度160℃；检测器温度140℃；载气N2，流速 30mL/min，H2流速60mL/min，空气流速60 mL/min。 3.试样的定性定量分析 ①取两支10μL微量注射器，以溶剂（如无水乙醇）清洗完毕后，备用。 ②打开色谱工作站，观察基线是否稳定。 ③基线稳定后，将其中一支微量注射器用丁醇测试标样润洗后，准确吸取1μL该标样按规范进样，启动色谱工作站，绘制色谱图，完毕后停止数据采集。 ④按相同方法再测定2 次丁醇测试标样与3 次丁醇试样，记录主要色谱峰的峰面积。 ⑤在相同色谱操作条件下分别以叔丁醇、仲丁醇、异丁醇与正丁醇(GC级) 标样(用蒸馏水稀释至适当浓度) 进样分析，以各标样出峰时间(即保留时间) 确定丁醇测试标样与丁醇试样中各色谱峰所代表的组分名称。 4. 结束工作 ①实训完毕后先关闭氢气钢瓶总阀，待压力表回零后，关闭仪器上氢气稳压阀，关闭氢气净化器开关。 ②关闭空气钢瓶总阀，待压力表回零后，关闭仪器上空气稳压阀，关闭空气净化器开关。 ③设置汽化室温度、柱温在室温以上约10℃、检测室温度120℃。 ④待柱温达到设定值时关闭气相色谱仪电源开关。 ⑤关闭载气钢瓶和减压阀，关闭载气净化器开关。 ⑥清理台面，填写仪器使用记录。 五、注意事项 1．吸取标样和样品溶液的微量注射器必须专用。不得将针芯拉出，否则会造成损坏。吸取标样和样品溶液的微量注射器必须专用。不得将针芯拉出，否则会造成损坏。 2．判断氢火焰是否点燃的方法：将冷金属物置于出口上方，若有水汽冷凝在金属表面，则表明氢火焰已点燃。 六、 数据记录与处理 1．记录色谱操作条件，并对的色谱分离图进行适当优化处理。 2．数据处理 a.对丁醇测试标样所绘制色谱图，按公式fiˊ= fif b.对丁醇试样所绘制色谱图，按公式 ω i= fiˊ 计算丁醇试样中各同分异构体的质量分数（％），并计算其平均值与相对平均均差（％）。 七、问题与讨论 1.在气相色谱定量分析时，峰面积为什么要用校正因子校正？ 2.实训结束应如何正常关机﹖ 3.什么情况下可以采用峰高归一化法﹖如何计算？ 4.本实训用DNP柱分离伯、仲、叔、异丁醇时，出峰顺序如何﹖有什么规律吗﹖