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文件类别:医疗管理
编码: XC-DJPS-YLGL-XK-001-01
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初审日期:2014年1月20日
批准日期:2014年10月20日
执行日期:2014年10月20日
回顾日期:2014年10月20日
微柱凝胶卡标准操作程序(SOP)
襄城县人民医院血库
目 录
1、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序(SOP) 3
2、ABO、RhD血型检测卡标准操作程序(SOP)5
3、不规则抗体筛检卡标准操作程序(SOP)8
4、抗人球蛋白交叉配血卡标准操作程序(SOP) 10
5、新生儿溶血病检测卡标准操作程序(SOP) 11
6、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序(SOP)13
7、新生儿溶血病母体IgG抗体效价检测卡标准操作程序(SOP)15
8、微柱凝胶检测卡在实验室操作的注意事项 17
一、ABO.RhD血型抗原检测卡标准操作程序(SOP)
一、准备工作
1、微柱凝胶试剂卡的准备:
观察外观,如有干胶、杂质、气泡不可使用,之后将卡放置室温
(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
2、检测标本的准备:
红细胞悬液的制备:取被检者压积红细胞10微升,加入1毫升红细胞稀释液,此浓度大约为0.8%-1%。外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
操作步骤
将准备好的微柱凝胶试剂卡做好标记。
将配制好的被检者红细胞悬液分别加入第1至第3管或第第4至第6管中,每管50微升。
即刻使用专用离心机离心5分钟(900rpm2分钟,1500rpm3分钟),取出肉眼判定结果。
血型判定见表:
血型
抗A
抗B
抗D
D
阳
性
A
+
—
+
B
—
+
+
O
—
—
+
AB
+
+
+
D
阴
性
A
+
—
—
B
—
+
—
O
—
—
—
AB
+
+
—
注意事项
检测标本必须为抗凝血。
红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可
能应用当日采集的新鲜血做本试验。
如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体
阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。
若结果为±或1+需进一步分析,可能为亚型或弱化抗原。
5、红细胞悬液的浓度控制在0.8%-1%之间,否则可能出现漏检或混合凝集。
每日实验前,先取出微柱凝胶卡放置一段时间至室温,
以防冷凝集。
7、试剂卡应放在18-25℃储存,如若长期放在4℃冰箱,建议
每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡。
四、参考文献:1、《输血技术学》
2、《全国临床检验操作规程》第三版
二、ABO、RhD血型检测卡标准操作程序(SOP)
一、准备工作
(一)微柱凝胶试剂卡的准备:观察外观,如有干胶、杂质、气
泡不可使用,之后将卡放置室温(18-25℃)平衡,再用专用离心机离心5分钟。
(二)检测标本的准备:
1.红细胞悬液的制备:取被检者压积红细胞10微升,加入1毫
升红细胞稀释液,外观应为均匀淡红色,无絮状物和血块。
2.血清标本的制备:采集被检对象静脉血,放入兔脑粉或其它
促凝剂的试管中,10分钟后离心,取上清;或者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置 12小时,或37℃放置2小时后离心,2000r/min,10分钟,取上清(该上清不得有絮状物或沉淀)。
二、操作步骤
1.将准备好的ABO.RhD血型定型试剂卡做好标记
2.将待检者0.8%-1%红细胞悬液分别加入第1至第4管中,每管50ul
3.将待检者血清分别加入第5和第6管,每管50ul
4.将已知的A型和B型红细胞0.8%-1%浓度悬液或ABO血型反定型红细胞试剂,每管50ul分别加入第5和第6管
5.即刻使用专用离心机离心,900rpm2分钟,1500rpm3分钟,取出肉眼判定结果。
结果判定:
阳性结果:红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
阴性结果:被检红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的尖底部。
血型判定:
血型
抗A
抗B
抗D
阴性对照
A细胞
B细胞
D
阳
性
A
+
—
+
—
—
+
B
—
+
+
—
+
—
O
—
—
+
—
+
+
AB
+
+
+
—
—
—
D
阴
性
A
+
—
—
—
—
+
B
—
+
—
—
+
—
O
—
—
—
—
+
+
AB
+
+
—
—
—
—
注意事项
1.检测标本必须为抗凝血。
2.红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。
3.血清标本:血清标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红
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