实验6水的卫生细菌饭学检验.pptVIP

实验五 水的卫生细菌学检验（二）;实验原理 水中大肠菌群数的测定原理： 为什么选用大肠菌群作为水的卫生指标？ 如何测定？ 平板菌落计数法的原理？ ;实验内容 制备EMB平板 将预先融化好的EMB琼脂倾注在培养皿中，冷却凝固后备用（约15～20ml/皿，8皿/大组）； 菌悬液的稀释 分装无菌生理盐水至空试管，9ml/管，4管/2人组，并分别标示10-1～ 10-4 ； 用无菌吸管精确地吸取1ml已充分混匀的菌悬液，注入10-1试管中（注意吸管不要碰到水面）。然后另取1支无菌吸管，于10-1试管中来回吹吸三次，使之混匀，即成10-1稀释液。再从10-1试管中吸1ml注入10-2试管中，重复上述操作，直至制成10-4稀释液。 ; 倾注平板（平板菌落计数） 取无菌培养皿6套，每2套为一组，在每组皿底分别写上10-1、10-2、10-3； 用对应的无菌吸管分别吸取10-1、10-2和10-3稀释液各1ml，对号放入编好号的无菌培养皿中； 尽快向上述盛有不同稀释度菌液的平皿中倒入融化后冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，每皿约15ml，置水平位置迅速旋转平皿，使培养基与菌液混合均匀，而又不使培养基荡出或溅到皿盖上； 待培养基凝固后，倒置于37℃恒温培养箱中培养24h，观察结果。 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 接种液体发酵管（MPN法） 取乳糖胆盐发酵管9支，每3支为一组，分别标示1、0.1、0.01 ，另1支为空白对照； 用对应的无菌吸管分别吸取10-3稀释液1ml、10-4稀释液1ml和0.1ml，分别接种至上述已标记好的发酵管中，轻轻振荡（或旋转）混匀，3支/稀释度； 置于37℃恒温培养箱中培养24h，观察结果。 ; EMB平板划线 将接种环在酒精灯火焰上灭菌； 用灭菌的接种环沾取菌悬液少许； 用接种环在EMB平板上划线（约平板1/4），将接种环加热灭菌，并旋转平板（约80～90°），继续划线。如此反复进行3～4次； 倒置于37℃恒温培养箱中培养24h，观察结果。 ;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;五. 实验结果报告与思考题 平板菌落计数：统计每个稀释度2个平板上生长的菌落数??求出平均值，并按讲义P27～ P28 所述原则计算出菌液中细菌含量； 大肠菌群数测定：观察每个稀释度中3管的生长（变混浊）、产酸（变黄）和产气（杜氏小管上端有气泡）情况，记录，并查找讲义P26大肠菌群细菌的最近似数检索表，计算所给菌液中大肠菌群细菌数。 EMB平板划线分离：观察每个区菌体生长情况，是否有单菌落出现，出现在第几区以及菌落形态、颜色和表面色泽。 思考题：讲义P20 6； P25 2 ； P28 4