基因组学02510不535159.pptVIP

YAC 载体的工作原理(P442图18-10): BamHⅠ切割后形成微型酵母染色体→EcoRⅠ切割sup4 内部的位点形成染色体的两臂→与外源DNA 在该切点相连形成人工酵母染色体→转化入酵母菌→通过复制、分裂，克隆大片段DNA 。 YAC 文库装载的 DNA 片段的大小一般可达 200-500kb，有的可达 1Mb 以上，甚至达到 2Mb 。 YAC的主要缺点：1．存在高比例的嵌合体，即一个YAC克隆含有两个本来不相连的独立片段；2．部分克隆子不稳定，在转代培养中可能会发生缺失或重排；3．插入DNA片段的分离和纯化困难，因为YAC与酵母染色体具有相似的结构。4．转化效率低。 18.4.2 细菌人工染色体 细菌人工染色体（BAC）：以细菌F因子为基础，人工构建的环状的DNA分子。可以携带大于100-350Kb的外源DNA片段。 BAC载体的优点： 较为稳定；没有嵌合现象；转化效率高； BAC克隆易于操作和DNA提取；BAC文库筛选方便。 选择标记：氯霉素抗性基因等。 * 18 基因组学与后基因组学 18.1 人类基因组计划与基因组学 1 基因组：生物体配子中所包含的全部染色体及其基因，还包括细胞质基因组。 基因组学:研究生物体内基因组的分子特征。 以整个基因组为研究对象，而不是以单个基因为 单位作为研究对象。 主要目标： 认识基因组的结构、功能和进化；