重组大肠杆菌HW2利用甘油产氢气的研究-高校化学工程学报.PDF

第 29 卷第 5 期 高 校 化 学 工 程 学 报 No.5 Vol.29 2015 年 10 月 Journal of Chemical Engineering of Chinese Universities Oct. 2015 文章编号：1003 9015(2015)05 1133 05 重组大肠杆菌 HW2 利用甘油产氢气的研究  刘 晴, 熊得王, 胡洪波, 张雪洪 (微生物代谢国家重点实验室, 上海交通大学生命科学技术学院, 上 200240) 摘 要 ：从前期得到的一株能在厌氧下高效利用甘油的大肠杆菌突变株 HW2 出发，通过基因工程改造，提高菌株利 用甘油产氢气的能力。 首先敲除乳酸脱氢酶基 ldhA 和丙酮醛合成酶基 mgsA ，得到工程菌株 HW2 ΔldhAΔmgsA 。 将该菌株在甘油培养基中厌氧培养，结果表明敲除这两基 不影响菌株的生长。培养 48 h 后，菌株 HW2 ΔldhAΔmgsA 的氢气产量为(410.6±33.0) μmolmg protein1，是出发菌株 HW2 的 1.6 倍。接着在该菌株中过表达经密码子优化的弗氏 柠檬杆菌二羟基丙酮激酶来进一步提高氢气的产量。最终获得氢气高产菌株 HW2 ΔldhAΔmgsA pCA24N dhaKL ，经过 厌氧培养 48 h 后，氢气产量为(571.5±30.3) μmolmg protein1，是出发菌株HW2 的2. 1 倍。 关键 ：氢气；大肠杆菌；甘油；乙醇 中图分类号：TQ923 文献标识码：A DOI ：10.3969/j.issn.1003 9015.2015.05.016 Hydrogen Production from Glycerol Using a Genetically Engineered Escherichia Coli HW2 Strain LIU Qing, XIONG De wang, HU Hong bo, ZHANG Xue hong (Key Laboratory of Microbial Metabolism, School of Life Sciences and Biotechnology,