临床分离肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子的结构与功能-中国管理科学.PDF

Hereditas (Beijing) 2014 年6 月, 36(6): 603 ―610 研究报告 临床分离肺炎克雷伯菌Ⅰ类整合子的结构与功能 1,3 1 1 1,2 1 1 1 张跃进 , 常清利 , 汪倩 , 卢俊婉 , 王欢 , 李佩珍 , 应俊 , 包其郁1, 胡云良1 1. 温州医科大学检验医学与生命科学学院, 温州 325000; 2. 丽水学院医学院, 丽水 323000; 3. 温州医科大学护理学院, 温州 325000 摘要:为了探索细菌多重耐药性的产生和播散的分子机制, 文章对 2002 ～2007 年间 179 株临床分离的肺炎克 雷伯菌进行耐药性、I 类整合子可变区基因盒结构以及基因盒携带的耐药性基因进行分段克隆和耐药性功能测 定。结果显示：65.9%(118/179) 的肺炎克雷伯菌表现出对至少两种以上的抗生素(主要为β- 内酰胺类、氨基糖苷 类和喹诺酮类抗菌药物) 的耐药性; 36.3%(65/179)的菌株检出单条或者双条I 类整合子基因盒条带; 对整合子阳 性组与阴性组的耐药率进行比较发现, 除氨基糖苷类、喹诺酮类和复方新诺明等药物的耐药性存在显著性差异 (P0.01)外, 其余药物的差异不显著; 共发现 15 种耐药基因构成形式的整合子基因盒, 其中以dfrA17-aadA5 最 为多见, 实验证明整合子可由接合转移耐药性质粒携带; 对整合子基因盒(dhfr17-orfF-aadA2)分段克隆的耐药 性功能研究发现, 3 个克隆重组子(pET28a-dhfr17 、pET28a-dhfr17-orfF 和pET28a-dhfr17-orfF-aadA2)对复方新 诺明的抗性(MIC 值)均为256 µg/mL, 重组子pET28a-dhfr17-orfF 与重组子pET28a-dhfr17 对链霉素的抗性无明 显区别, 和受体菌一样MIC 值均为8 µg/mL, 而pET28a-dhfr17-orfF-aadA2 对链霉素的抗性则明显提高, MIC 值为 256 µg/mL 。结果表明, I 类整合子在肺炎克雷伯菌中较常见, 携带氨基糖苷类和甲氧苄啶类的耐药基因盒 在数量上占优势, 且整合子携带的耐药基因具有耐药性功能, 位于可水平转移耐药性质粒的耐药性基因相关的 整合子对病原菌耐药性播散具有重要意义。 关键词: I 类整合子; 基因盒; 克隆; 耐药性 Structure and function of class 1 integron in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae 1, 3 1 1 1, 2 1 1 Yuejin Zhang , Qingli Chang , Qian Wang , Junwan Lu , Huan Wang , Peizhen Li , 1 1 1 Jun Ying , Qiyu Bao , Yunliang Hu 1. School of Laboratory and Life Sciences, Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000, China; 2. School of Medicine, Lishui College , Lishui 323000, China; 收稿日期: 2013− 1