半滑舌鳎Cynoglossussemilaevis体表色素细胞观察-渔业科学进展.PDF

第36 卷 第2 期 渔 业 科 学 进 展 Vol.36, No.2 2 0 1 5 年 4 月 PROGRESS IN FISHERY SCIENCES Apr., 2015 DOI: 10.11758/yykxjz / 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis) 体表色素细胞观察及POMC 表达特性分析* 1,2 1 3 1① 4 1,2 史学营 徐永江 武宁宁 柳学周 杨洪军 臧 坤 史 宝1 李存玉1,2 (1. 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071 ； 2. 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306 ；3. 青岛市海洋与渔业局渔业技术推广站 青岛 266001 ； 4. 日照市水利养殖场 日照 276805) 摘要 为认识养殖半滑舌鳎无眼侧黑化的细胞学特性，利用显微观察方法研究了其皮肤黑色素细 胞、黄色素细胞和虹彩细胞的形态特征，比较了3 种色素细胞在有眼侧皮肤、无眼侧正常和黑化皮 肤中的数量分布特征。为进一步揭示无眼侧黑化的分子机制，克隆了半滑舌鳎POMC 基因的cDNA 序列。结果显示，黑色素细胞较大，含黑色和棕色的色素颗粒，有树突状分枝不明显和延伸成放射 状两种形态；黄色素细胞较小，含黄色素颗粒；虹彩细胞最小，含鸟粪素颗粒。半滑舌鳎 POMC 基因的cDNA 序列长910 bp ，包括一个114 bp 的5非翻译区和一个154 bp 的3非翻译区，开放阅 读框长度为642 bp ，共编码213 个氨基酸，包含ACTH 、α-MSH、β-MSH、γ-LPH、β- 内啡肽5 个 多肽序列，但缺失γ-MSH 和大部分连接区。半滑舌鳎POMC 基因的氨基酸序列与其他鱼类的同源 性为30%−64%。定量PCR 分析显示，POMC mRNA 主要在垂体中表达，其次是脑、性腺和无眼侧 黑化皮肤。正常与黑化皮肤中的差异表达结果显示，无眼侧黑化皮肤中POMC mRNA 表达量最高， 并与有眼侧皮肤和无眼侧正常皮肤中的POMC mRNA 表达量差异显著，揭示了POMC 的表达与无 眼侧黑化性状密切相关。 关键词 半滑舌鳎；色素细胞；POMC ；基因克隆；组织表达 中图分类号 S968 文献标识码 A 文章编号 2095-9869(2015)02-0045-10 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)主要分布在黄 无眼侧黑化现象成为产业发展的一个制约因素。 渤海海域(姜言伟等, 1993) ，是一种重要的人工增养 国内外学者就养殖鲆鲽类的无眼侧黑化现象及 殖鱼种(邓景耀等, 1988; 肖登元等, 2014; 于朝磊等, 其可能机制开展了诸多研究，主要集中在色素细胞 2014) 。近年来，半滑舌鳎养殖产量不断增加，已形 (Shikano et al, 2007; Isojima et al, 2013)、环境因素影 成规模化养殖(柳学周等, 2014) 。但是，在养殖生产 响(Kang et al, 2012)、功能基因调控(Kobayashi et al, 中养殖鱼存在较高比例的无眼侧黑化现象，主要表现 2009; Takahashi et al, 2005、2009; Yoshikawa et al, 为腹面部分(20%−50%)覆盖斑状色素群(主要出现在 2013)等方面，但黑化形成的具体机制尚未明了。在 腹面的尾部、中部)或腹面全部覆盖黑色素，且发生 色素细胞研究方面，国外学者对牙鲆(