发酵发生产谷氨酸工艺探讨.pptVIP

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发酵法生产谷氨酸工艺探讨 自从60年代以来,微生物直接用糖类发酵生产谷氨酸获得成功并投入工业化生产。我国成为世界上最大的味精产业大国。味精成为调味品的重要成员之一,氨基酸的研究和生产得到了迅速发展。二次世界大战后不久,美国有人提出用发酵法生产谷氨酸的报告。 谷氨酸产生菌主要是棒状类细菌,这类菌中含质粒较少,而且大多数是隐蔽性质粒,难以直接作为克隆载体,而且此类菌的遗传背景、质粒与已知的质粒进行重组,构建杂合质粒。经研究,通过基因工程技术发酵谷氨酸比普通发酵技术发酵谷氨酸的产量大大提高,这对以后谷氨酸发酵的低成本、大规模、高质量有较大的发展空间。 1.谷氨酸发酵的工艺流程 保藏菌株 → 斜面活化 → 摇瓶种子培养 → 种子罐 → 发酵罐 32℃培养24h (1000ml三角瓶 30-32 ℃培养10-12h 30-34通风搅拌容量180- 200mL) 接种0.2%-0.5% 通风搅拌培养6-8h 2.1环境控制 2.1.1 pH 谷氨酸生产菌的最适ph一般是中型或微碱性ph7.0-8.0条件下累计谷氨酸,发酵前期的ph值以7.5左右为宜,中后期以7.2左右对提高谷氨酸产量有利。 谷氨酸产生菌象其他微生物一样,有最适生长ph值范围,最高于或低于这个值时: 1)抑制 菌体新陈代谢受阻,生长停滞; 2)改变 改变细胞膜的渗透性,影响菌体对营养的吸收和代谢产物的排出; 3)影响 培养基组分和中间代谢产物的解离,从而影响菌体对这些物质的利用。 2.1.6 通风量 谷氨酸生产菌是兼性好氧菌,有氧、无氧的条件下都可能生长,只是代谢产物不同。谷氨酸发酵过程中,通风必须适度,过大菌体生长慢,过小产物由谷氨酸变为乳酸。应在长菌期间低风量,产酸期间高风量,发酵成熟期低风量。其中,谷氨酸发酵罐现均采用气一液分散较理想的圆盘涡轮式多层叶轮搅拌器。 2.1.8无菌 谷氨酸生产菌对染菌及噬菌体的体抗力差。一旦染菌,就会造成减产或无产现象的发生,预示着谷氨酸发酵生产的失败,这使厂家造成不同程度的损失。所以预防及挽救很重要的。 2.2细菌膜渗透性控制 由于谷氨酸的分泌是由细胞膜控制的,所以细胞膜渗透性的控制极为重要。细胞膜渗透性控制既使胞内的代谢产物迅速渗透出去,接触末端产物的反馈控制。可通过控制磷脂的合成、细胞壁的合成以及选育温敏突变株来控制细胞膜通透性。 3、基因工程育种在谷氨酸生产菌选育中的应用 基因工程育种(genetic engineering)是利用DNA重组技术的方法,把DNA作为组件,在细胞外将一种外源DNA(目的基因)金额载体DNA重新组合连接(重组),最后将重组体转入宿主细胞,使外源基因DNA在宿主细胞中,随细胞的繁殖而增殖,或最后得到表达,最终获得基因表达产物或改变生物原有的遗传性状。 3.1载体 由于谷氨酸生产菌主要是棒状类细菌,这类细菌中含质粒较少,而且大多数是隐蔽性质粒,难以直接作为克隆载体,需要对他们进行改建,将棒状类细菌质粒与已知的质粒进行重组,构建成杂合质粒。 3.2受体 受体菌选用短杆菌属的野生菌或异变株,特别是选用谷氨酸缺陷型变异株为受体,便于从转化后的杂交克隆中筛选产谷氨酸的个体,用谷氨酸产量高的野生菌或变异菌作为受体效果更好。 3.3供体菌株 供体菌株选择短杆及棒杆菌属的野生菌或变异株,只要具有产谷氨酸能力的都可选用,但选择谷氨酸产量高的菌株作为供体效果最好。 4、谷氨酸在实际生活中的用途 谷氨酸在生物体内的蛋白质代谢过程中占重要地位,参与动物、植物和微生物中的许多重要化学反应。 4.1食品工业 氨基酸作为人体生长的重要营养物质,不仅具有特殊的生理作用,而且在食品工业中具有独特的功能。构成蛋白质的氨基酸主要有20多种。在食品工业中应用较多的氨基酸有谷氨酸、赖氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、苏氨酸、精氨酸、缬氨酸、色氨酸、丙氨酸等。各种氨基酸都有自己独特的呈味效应,其中应用较多的有谷氨酸钠和甘氨酸。 谷氨酸钠俗称味精, 味精是常用的仪器增鲜剂,其主要成分是谷氨酸钠盐。是重要的鲜味剂,对香味具有增强作用。 4.2日用化妆品 谷氨酸作为营养药物可用于皮肤和毛发。N—酰基谷氨酸钠系列产品是由谷氨酸缩合而成的性能优良的阴离子表面活性剂,广泛用于化妆品、香皂、牙膏、香波、泡沫浴液、洗洁净等产品中。焦谷氨酸钠(味精脱水生成的产物)具有极强的吸湿性,能保持皮肤湿润,防止干燥,并增强皮肤和毛发的柔软和弹力。日本己有以谷氨酸钠(或谷氨酸)为原料生产的高级人造革、化妆品和洗涤剂等产品。 聚谷氨酸是一种出色的环保塑料,可用于食品

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