AxyPrepmiRNA小量制备试剂盒.PDFVIP

08/05Ver.1 AxyPrep miRNA小量制备试剂盒 本试剂盒用于从各种动物组织、植物组织和细胞中提取 miRNA。提取的 miRNA 分子完整、纯度高， 适用于 Northern Blot 、Real-Time PCR、miRNA 微列阵芯片、原位杂交、RNase 保护测定等各种分子生 物学实验。 一、试剂盒组成、贮存、稳定性 Cat. No. AP-MN-MIRNA-4 AP-MN-MIRNA-50 AP-MN-MIRNA-250 制备次数 4 preps 50 preps 250 preps Spin/vac mini column 4 50 250 2 ml 离心管 4 50 250 1.5 ml 离心管 4 50 250 Buffer R- Ⅰ 3 ml 25 ml 125 ml Buffer R- Ⅱ 1 ml 10 ml 50 ml Buffer TE （nuclease-free） 1 ml 6 ml 30 ml 说明书 1 1 1 Spin/vac mini column：小量制备管。室温密闭贮存。 Buffer R- Ⅰ：细胞裂解液。室温密闭贮存。 Buffer R- Ⅱ：中和液。室温密闭贮存。 Buffer TE （nuclease-free） ：洗脱液。10 mM Tris-Cl，0.1 mM EDTA，pH 7.5。 室温密闭贮存。 二、注意事项 Buffer R- Ⅰ含刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套和眼镜，避免沾染皮肤、眼睛和衣服，谨防吸 入口鼻。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或生理盐水冲洗，必要时寻求医疗咨询。 三、实验准备 1. 所有试剂用DEPC处理过的溶剂配制。请选用RNase-free枪头和离心管，以避免提取过程中RNA 被RNase降解。 2. 70%乙醇，-20℃预冷。 四、操作步骤 不同的样品提取miRNA的操作中略有区别，具体步骤分述如下： 爱思进生物技术（杭州）有限公司 电话：0571传真：0571E-mail: technical@ Page 1 08/05Ver.1 【从动物组织中提取miRNA】 1. 取20-40 mg组织，转移至预冷的研钵中，加液氮研磨成粉末。 *请按下面说明使用组织的量： RNA 丰富的组织 (如肝脏) 不超过 30 mg RNA 含量低的组织 (如肌肉) 不超过 100 mg 当使用的组织量小于 20 mg 时 R- Ⅰ，R- Ⅱ和异丙醇的使用量都减半 当使用的组织量大于40 mg 时 R- Ⅰ，R- Ⅱ和异丙醇的使用量按比例增加