猪前体脂肪细胞的分离培养.PDFVIP

细胞生物学杂志 Chinese Joumal of Cell Biology 2005 , 27: 693-696 猪前体脂肪细胞的分离培养 志 张国华杨公社屈长青孙世锋* 杂 (西北农林科技大学，动物脂肪沉积与肌肉发育实验室，杨凌712100) 学 摘要 在比较组织块法和消化法分离培养猪前体脂肪细胞的基础上，通过对前体脂肪细胞 物 增殖与分化过程中细胞的形态学变化、生长曲线、油红0 染色以及脂肪细胞特异性标志基因脂蛋 白脂酶(lipoprotein lipase , LPL)和过氧化物体增殖剂活化受体y (peroxisome proliferators-activated 生 recepωr y, PPAR1表达的研究，证明用消化法可从猪的脂肪组织中分离获得大量的前体脂肪细胞， 胞 志 其生长旺盛，可见自发充脂;传代细胞经诱导培养后，充脂率大幅度提高，脂肪特异性标志基因 表达增强。这为深入研究脂肪细胞增殖与分化以及猪体脂肪沉积提供了一个较好的模型。 细 杂 关键词 猪:前体脂肪细胞:传代:诱导 学 物 脂肪细胞的体外培养始于20世纪60年代初。目 1.1.2 试剂和仪器 DMEM 培养基和 I 型胶原酶 前，最常用的有两种体外培养系统，即前体脂肪细 购自 Gibco BRL 公司:胎牛血清购白杭州四季青公 生 胞系(preadipocyte cellline)和原代前体脂肪细胞(p由n缸y 司:牛血洁白蛋白购自 Amersco 公司:反转录试 胞 preadipocyte culture) 。现己建立的最有代表性的两 剂盒购自 Fermentas 公司; TRlzol 购白天为时代: 引物由上海生工合成;其他试剂均购自华美生物工 个前体脂肪细胞系是从小鼠胚胎的Swiss3T3 细胞中 细 程公司:培养瓶和培养皿购白 Corning 公司。 CO 诱导分化出来的，即 3T3-F442A 和 3T3-L1 前体脂