第01慢章核酸.pptVIP

第 1 章 核酸的结构和功能;核酸是一类重要的生物大分子，担负着生命信息的储存与传递。 核酸是现代生物化学、分子生物学的重要研究领域，是基因工程操作的核心分子。;核 酸(nucleic acid) 的概念 ;一、核酸的发现和研究工作进展 ;二、核酸的分类及分布 ;第二节 核酸的组成成分;核酸的化学组成 ;一、戊 糖;嘌呤(purine) ;;;核苷：AR, GR, UR, CR 脱氧核苷：dAR, dGR, dTR, dCR;核苷酸： AMP, GMP, UMP, CMP 脱氧核苷酸： dAMP, dGMP, dTMP, dCMP ;体内重要的游离核苷酸及其衍生物;5′端;一、核酸的一级结构;5′-磷酸端（常用5’-P表示）；3′-羟基端（常用3’-OH表示） 多聚核苷酸链具有方向性，当表示一个多聚核苷酸链时，必须注明它的方向是5′→3′或是3′→5′，一般默认为从左到右为5’-3’。;DNA一级结构的意义;DNA的二级结构-双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模??要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 DNA的功能;（一） DNA的二级结构 ——双螺旋结构;（一）DNA双螺旋结构的研究背景;（二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;（二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;碱基互补配对 ;（二） DNA双螺旋结构模型要点 （Watson, Crick, 1953）;4.DNA双螺旋结构的多样性;三种类型DNA的结构参数;二、DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装;意义 DNA超螺旋结构整体或局部的拓扑学变化及其调控对于DNA复制和RNA转录过程具有关键作用。 ;（二）原核生物DNA的高级结构;（三）DNA在真核生物细胞核内的组装;压缩了1000-2000倍 ;三、DNA的功能;第三节 RNA的结构与功能;RNA的种类、分布、功能;一 、信使RNA的结构与功能;* 真核生物mRNA结构特点;帽子结构;促进mRNA由胞核向胞质的转位 维持mRNA的稳定性 翻译起始的调控 ;* mRNA的功能 把DNA的碱基序列翻译成蛋白质的氨基酸顺序。;* tRNA的一级结构特点 含 10~20% 稀有碱基 3′末端为 — CCA-OH 5′末端大多数为G 具有 T?C环 ;N,N二甲基鸟嘌呤;* tRNA的二级结构 ——三叶草形 氨基酸臂 DHU环 反密码子环 额外环 TΨC环;;* rRNA的结构;rRNA的种类（根据沉降系数） 沉降系数：单位时间内的沉降速度;核蛋白体的组成;核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid;核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性，其中的碱基又具有碱性，所以为两性电解质。 可与金属离子成盐，不溶于乙醇或异丙醇。 核酸的高分子性质 粘度： DNARNA dsDNA ssDNA 沉降行为 核酸的紫外吸收(OD260) 单核苷酸 ssDNA(或RNA) dsDNA 核酸的分离方法：电泳-------依据分子量大小 离子交换法-----依据电荷;1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50μg/ml双链DNA 40μg/ml单链DNA（或RNA） 20μg/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0;二、DNA的变性(denaturation);;例：变性引起紫外吸收值的改变;热变性; Tm：DNA变性时紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA的解链温度，又称融解温度(melting temperature, Tm)。 影响Tm的因素：大小、G+C含量;三、DNA的复性与分子杂交 ;不同来源的核酸链分子复性时形成杂化双链过程叫分子杂交。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。;核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置 确定两种核酸分子间的序列相似性 检测某些专一序列在待检样品中存在与 否 是基因芯片技术的基础 ; 核 酸 酶 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶;核酸酶的分类 依据底物不同分类 DN