拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测-BBRC-华中农业大学.PDF

第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 31 2 Vol.31 No.2 年 月 , 2012 4 JournalofHuazhon A riculturalUniversit A r.2012171~177 g g y p 拟南芥纤维素合酶的抗体制备与检测 ,, ,, ,, ,,, , 陶章生123 徐 雯123 张苗苗123 彭良才1234 丰胜求24 , ; 1.华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 武汉430070 , ; 2.华中农业大学生物质与生物能源研究中心 武汉430070 , ; 3.华中农业大学生命科学技术学院 武汉430070 , 4.华中农业大学植物科学技术学院 武汉430070 , 摘要 将拟南芥 家族基因的高变区克隆到融合表达载体 中 构建重组质粒 CesA pGEX-4T-3 pGEX-AtCe - , ( )。 sAs在大肠杆菌JM109中经 IPTG诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白 GST-AtCESAs 采用 GST亲和 。 , 层析法纯化 并制备了多克隆抗体 检测表明 抗体 和 GST-AtCESAs Westernblotting AntiCESA4 AntiCE - - - - 存在明显的交叉反应, 、 、 、 、 、 均 SA7 AntiCESA1AntiCESA3AntiCESA6AntiCESA2AntiCESA5AntiCESA8 - - - - - - , 。 能在拟南芥原生质膜上检测到特异免疫条带 这为进一步深入研究拟南