免疫标记技术及分析应用.pptxVIP

第一节 免疫标记技术 用荧光素、放射性同位素、酶、发光剂、胶体金或电子致密物质等作为示踪剂，标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应。荧光显微镜，射线测量仪，酶标检测仪，电子显微镜和发光免疫测定仪等精密仪器，对实验结果直接镜检观察或进行自动化测定。免疫标记技术分类：免疫酶技术(ng)、放射免疫技术(pg)、免疫荧光技术、免疫电镜技术、免疫胶体金技术、发光免疫测定。特点：高度灵敏、特异、快速，定性、定量、定位免疫标记技术反应类型实验技术结果判断标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀免疫标记技术 用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性荧光素 ：异硫氰酸荧光素（黄绿色荧光）、藻红蛋白、 罗丹明（红色荧光）酶：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶放射性同位素： 125I、131I免疫荧光检测法（IFA）酶免疫检测法（EIA）放射免疫检测法（RIA）液相（ELISA）、固相（免疫组化技术）第二节 免疫荧光技术利用荧光素标记抗体或抗抗体以检测细胞表面或细胞内抗原的技术。 在荧光显微镜下，以紫外光为光源进行观察。当出现荧光时，表明标记抗体存在，相应的抗原也存在。直接法 间接法 直接法 间接法 FITC 异硫氰酸荧光素抗体的荧光素标记标记原理:利用抗体蛋白的自由氨基与FITC的异硫氰基在碱性溶液