第二章植件物细胞的获取.pptVIP

第二章　植物细胞的获取 第一节　外植体的选择与预处理 成功关键：培养基及培养条件、外植体的来源。 一、外植体的选择 从生长正常，无病虫害的母株中，选择适宜的组织器官 1、用于直接分离细胞的外植体的选择 原则：细胞之间粘连程度较小； 叶片最佳； 限制：机械或酶伤害细胞，完整细胞较少。 2、用于愈伤组织诱导的外植体的选择 双子叶植物中常用的外植体有：幼胚、成熟胚、下胚轴、子叶、叶片、根等。 单子叶植物中常用的外植体有：幼胚、成熟胚、细穗、花药等。 无论是双子叶植物还是单子叶植物、均以幼胚诱导愈伤组织的为最佳。因为幼胚诱导的愈伤组织质量最好，分化能力强。 基因型的影响：不同种类及不同品种之间存在差异； 同一植物，不同部位脱分化和再分化能力存在差异：百合：外层＞内层；紫草根＞茎叶；苹果顶芽褐变程度＜侧芽；兰科：茎尖； 还要考虑生产目的：选用植株中主要生产所需的的次级代谢产物的组织和器官 2、用于愈伤组织诱导的外植体的选择 外植体的生理状态：红豆杉：新生的嫩枝； 取材季节：母株生长旺盛的季节；紫草：秋天（紫草宁合成和积累）； 外植体大小：适当大小；脱毒率和茎尖大小及成活率之间的关系； 3、用于分离原生质体的外植体的选择 分离原生质体则以叶片为最好。苗龄与叶龄有关；太老不易游离，太嫩，易游离，但细胞膜易损害； 以苗龄15－25d，刚展开的幼叶为最佳。 无菌苗幼叶； 还要考虑培养目的； 多