分离科学与进展专题(一)2013..ppt

分离科学与进展 专题(一)样品前处理技术 讲座内容 = 为目标物质的洗脱时间曲线。 样品均匀分散在固体填料表面大约100A 。由厚的层面上。这时的样品已经变成为“固相填料”的一部分，可方便洗脱。 基质固相分散的原理 (J. Biochem.Biophys.Methods， 70:151； Trends in Anal.Chem. 25:96） 样品各组分、目标化合物、载体之间的相互作用在MSPD 中是同时发生的。 1）目标化合物与固相载体； 2）目标化合物与载体键合相； 3）目标化合物与分散样品组分； 4）其他样品组分与吸附剂； 5）其他样品组分与载体键合相； 6）洗脱溶剂与上述所有成分； 影响基质固相分散萃取的因素 样品的完全研磨粉碎并分散于柱中, 使载体、键合相以及基质组分相互作用。在MSPD 中, 目标物和载体之间、目标物和键合相之间、目标物和分散的基质之间、基质和载体之间以及基质和键合相之间均发生作用, 且所有上述的动态相互作用同时发生。因此, 可以看出键合相、载体及洗脱溶剂和洗脱分布模式都会对测定结果产生影响； 1）固相载体的性质 MSPD 应用键合硅胶作为固相载体。硅胶载体表面含有未键合的硅烷醇, 可以结合样品中的水, 对于含水量高的样品具有很重要的作用, 因为样品太湿, 装柱和洗脱都会很困难。在考察载体的孔径时,发现载体的孔径大小对MSPD 效果没有明显影响, 而载体粒径大小则是相对较重要的影响因素。粒径在3~ 20μm时, 不易洗脱; 粒径太大, 会使表面积太小, 总的吸附能力减弱, 净化效果变差。大多数情况下, 使用粒径为40μm的载体 。 2）键合相的性质 键合相在MSPD 中具有很重要的作用。一般, 碳链长, 固定相含碳量高, 固定相极性小; 碳链短, 则固定相极性大。含氰基、氨基的固定相极性较大, 常用作正相吸附剂, 用于极性较大农药的萃取 。MSPD 中应用较多的是反相键合相, 如C18 和C8, 因其具有亲脂性, 结合溶剂有助于破坏细胞膜并将组织分散, 主要用于分离亲脂性的物质。 (J. Chromatogr. A， 885 :115） 影响基质固相分散萃取的因素 3）样品基质的影响 由于样品基质成为层析相的一部分, 不同样品的油脂成分、蛋白质含量及其分布状态不同, 所以目标物在不同基质中的测定结果和回收率也不相同。基质在载体中的分散状态与键合相在载体上的稳定结合不同, 基质组分会与载体和洗脱液发生动态相互作用, 某些基质成分也会被洗脱下来。与SPE 柱用于液体样品一样, MSPD 中有时候也需要加入酸、碱或离子对试剂到基质或是洗脱剂中, 以改变其性能。分析物和样品组分的电离或电离的抑制可大大影响特定分析物与基质组分和洗脱溶剂相互作用的性质。 4）洗脱液的种类及洗脱顺序 洗脱液的种类及其添加顺序是使MSPD 成功的最重要因素。洗脱溶剂的选择与分析物和载体键合相的性质密切相关。理想的洗脱溶剂应满足以下两个要求: (1) 溶剂强度足够大, 即: 使用该洗脱溶剂时分析物的保留因子K w 尽可能小; (2) 溶剂应与后续的检测方法相适应。因此, 可以通过改变洗脱分布模式或采用更进一步的净化方式以获得好的分离效果。通常情况下, 按照溶剂的极性从小到大开始洗脱, 先用正己烷淋洗, 然后依次用乙酸乙酯、乙腈、甲醇, 最后用水淋洗。 (J. Chromatogr. A， 885 :115） MSPD 技术的应用 MSPD 是简单高效的提取净化方法, 适用于各种分子结构和极性农药残留的提取净化。 1）研究基质 人体血浆、动物组织、谷类作物、牛奶、水果、蔬菜、中草药、土壤等。 2）目标物质 农药残留、兽药残留、药物代谢、表面活性剂等 3）分散剂 C8 和C18、NH2、CN、Florisil 硅土、硅藻土、石墨化碳黑等。 (J. Chromatogr. A， 885 :115） 优点： 1）适用于固体、半固体及黏稠样品的萃取； 2）萃取溶剂与目标化合物的接触面积大，有利于萃取； 3）溶剂完全渗入到样品基质中，提高了萃取效率； 4）相对于传统的液液萃取方法，萃取溶剂减少约95%； 5）样品用量小，萃取速度比LLE快约90%。 缺点: 1)不易实现自动化; 2)手工研磨工作量大; 3