汉滩病毒M和S基因不同拼接方式嵌合基因免疫效果的研.PDFVIP

维普资讯 第 l8卷 1期 中 国 病 毒 学 18(1)：14-17 2003年 2月 VIROLOGICA SINICA February 2003 汉滩病毒M 和S基因不同拼接方式嵌合基因免疫效果的研究 张芳琳，徐志凯，罗 雯，阎 岩 ，吴兴安 ，刘 勇，白文涛 ，赵 茜，王海涛 (第 四军医大学微生物学教研室，陕西 西安 710032) StudiesonGeneticImmunizationoftheChimericGenesofHantaan virusM andSSegmentsthatSplicedbyDifferentW ays ZHANGFang—lin， XU Zhi—kai， LUO Wen，YANYan，WU Xing—an，LIUYong， BAIWen—tao，ZHAOQian，WANGHai—tao (DepartmentofMicrobiology，而urthMilitaryMedicalUniversity,Xi’nn710032，China1 Abstract：RecombinanteuckaryoticexpressionvectorspcDNA3．1二G2S0．7andpcDNA3．1一S0．7G2were constructedbycloningchimericgenescontainingG2fragmentofM semg entand0．7Kb fragmentofS segmentintopcDNA3．1 (+、． ThenBALB／cmicewerevaccinatedbythetwovectors． EUSA results showedthatboththevectors couldinducespecificantibodiesagainstNPandGP．Thespecificantibody titers stimulatedbypcDNA3．1一G2S0．7wereobviouslyhigher、thatthatofpcDNA3．1一S0．7G2． MIT re— sultsshowedthatthestimulationindexesofsplenocytesofpcDNA3．1一G2S0．7toNPandGPweresig— nificantlyhigherthanthatofcontro1．However．thatofpcDNA3．1一SO．7G2wereequaltothatofcontro1． ItissuggestedthatthechimericgenesofHantaanviruscontainingG2fragmentofM semg entand 0．7KbfragmentofSsemg entcoulddirectlyspecificanti—Hantaanvirushumoralimmunityandcellular immunityinBALB／cmice．Th edifferentsplicingwayscouldaffecttheimmunityofchimericgenes． Keywords：Hantawtvirus；M semg ent；Ssemg ent；Chimericgene；Geneticimmunization 摘 要 ：本文在前期工作 的基础上 ，构建 了汉滩病毒 76一l18株 M基 因G2片段与 S基 因5端 0．7Kb片段 的嵌合基 因真核表达载体 pcDNA3．1一G2s0．7及 pcDNA3．1一SO．7G2；用该质粒免疫 BALB，c小 鼠，结果表 明两种质粒免疫小 鼠可 同时诱导产生抗汉滩病毒核蛋 白 (NP)及糖蛋 白 (GP)特异性的抗体 ，且前者刺激产生的抗体效价明显高 于后者 。淋 巴细胞增殖实验表 明，pcDNA3．1一G2s0．7组免疫小 鼠脾细胞时