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第三章 就核酸化学
第三 章 核 酸化学 ;生物体的分子组成:
蛋白质、核酸、糖、脂肪-四大基本物质。
水和无机盐及其他物质。
;第三章 核酸化学;第一节 核酸概述;一、核酸的生物学功能;人的染色体;唐氏综合征;性染色体与性别畸形;Klinefetter综合症(先天性睾丸发育不全) ;Turner综合症;Turner综合症(性腺发育不全) ;XYY或多个Y个体;XYY或多个Y个体;多X女性;核酸研究的发展简史;二、核酸的种类;三、核酸的分布;四、核酸的化学组成;第二节 核苷酸;一、组成成分; 组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为 β-D-2-脱氧核糖;RNA所含的糖则为β-D-核糖。;(二)、碱基;2. 嘧啶(Pyrimidine);3、稀有碱基;二、核苷和核苷酸的形成;Adenosine Guanosine Cytidine Uridine;酮式烯醇式互变异构;胺式亚胺式互变异构;稀有核苷;(二)、核苷酸(nucleotide) 核苷+磷酸 (磷酸酯键:戊糖C5’-OH与磷酸脱水);核苷酸(ribonucleotide)的结构与命名;;核苷酸衍生物;ATP的性质;2.环化磷酸化;cAMP(3’,5’-环化腺苷酸)和cGMP(3’,5’-环化鸟苷酸)的主要功能是作为细胞的第二信使。
cAMP和cGMP的环状磷酯键是一个高能键。在pH7.4, cAMP和cGMP的水解能约为43.9 KJ/mol,比ATP水解能高得多。;3. 辅酶
NAD+ (辅酶I,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)
NADP+ (辅酶II,烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸)
FMN (黄素单核苷酸)
FAD (黄素腺嘌呤二核苷酸)
CoA 辅酶A;4. 糖基载体
葡萄糖只有与UDP、ADP、GDP等核苷酸结合为UDPG、ADPG、GDPG等活化形式,才能进一步合成蔗糖和多糖。;第三节 核酸的结构;一、核苷酸的连接方式;二、DNA的结构;DNA一级结构的表示方法:;(二)、DNA的二级结构; 碱基组成规律——Chargaff 规则:;1、DNA双螺旋结构的要点;34;;计算机模拟DNA双螺旋结构(蓝色)大沟中结合着蛋白质(红色);;;;2、稳定双螺旋结构的力;3、DNA二级结构的多态性 ;①A-DNA:;②Z-DNA;;;;4、三链DNA;三链DNA;;;(三)DNA的三级结构 ;1、大多数原核生物 :
1)共价封闭的环状双螺旋分子
2)超螺旋结构:双螺旋基础上的螺旋化;2、真核生物细胞内-染色体;染色体;三、RNA的结构;(一)、tRNA的 二级结?? 和三级结构 ;tRNA的三级结构
倒L形结构 ;;(二)、mRNA的结构 ;;;(三)、rRNA的结构;;第四节 核酸的理化性质;一、一般性质;一、一般性质;二、紫外吸收性质;1. DNA或RNA的定量
OD260=1.0相当于
50μg/ml双链DNA
33μg/ml单链DNA
40μg/ml RNA
20μg/ml寡核苷酸
2.判断核酸样品的纯度
DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8
RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0
OD 260/ OD280值1.8,含RNA;
OD 260/ OD280值1.8时,含蛋白质 ;三、变性、复性与分子杂交;DNA变性;增色效应:DNA变性时其溶液OD260增高的现象。
当DNA分子从双螺旋结构变为单链状态时,它在260nm处的紫外吸收值便增大,此现象称为增色效应。;2、变性因素:;3、变性指标: ;Tm与下列因素有关:;(二)复性;DNA复性;核酸的光吸收值常比其各核苷酸成分的光吸收值之和少30-40%,这是在有规律的双螺旋结构中碱基紧密地堆积在一起造成的,此现象称为DNA的减色效应。 ;(三)分子杂交(hybridization) ;核酸的杂交;核酸与蛋白质的复合体;染色体;;烟草花叶病毒;噬菌体;核糖体
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