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第九章 微生物的遗传和变异 变异 适应 微生物遗传学的重要性 第1节 遗传变异的物质基础 1．转化实验 2．噬菌体的感染实验 3．病毒的拆开和重建实验 二、DNA的结构与复制 半保留复制 半保留复制的证明 三、遗传物质的存在方式 第二节 微生物的基因突变 基因突变与染色体畸变 一、基因突变的类型 1．形态突变型 2．生化突变型 ①营养缺陷型 ②抗性突变型 ③抗原突变型 3．致死突变型 4．条件致死突变型 二、基因突变的特点 1．不对应性 2．自发性 3．稀有性 4．独立性 5．诱变性 6．稳定性 7．可逆性 三、基因突变的自发性和不对应性的证明 1．变量试验 2．涂布试验 3．影印培养试验 四、突变的机制 亚硝酸 亚硝酸 5-BU （2）移码突变 （2）移码突变 （2）移码突变 （3）染色体畸变 （3）染色体畸变 2．自发突变的机制 （1）背景辐射和环境因素的诱变 （2）微生物自身代谢产物的诱变 （3）互变异构效应 （4）环出效应 （5）多功能诱变剂--UV 第3节 微生物育种 一、自发突变与育种 一、自发突变与育种 二、诱变育种 1．诱变育种的基本环节 2．诱变育种工作中的几个原则 3．营养缺陷型的筛选 3．营养缺陷型的筛选 三、原核微生物的基因重组 1．转化 1．转化 2．转导 （1）普遍转导 ①完全普遍转导 ②流产普遍转导 （2）局限转导 3．溶源转变 4．接合 5．原生质体融合 3. This discovery became the keystone of molecular biology and modern genetics. 4. A number of prokaryotes have been found to be naturally transformable, including certain species of both gram-negative and gram-positive Bacteria and some species of Archaea. 四、基因工程 基因工程的基本步骤 基因工程的基本步骤 基因工程的基本步骤 基因工程图解 第4节 菌种保藏 1．防止衰退 2．菌株复壮 二、菌种保藏方法 简称完全转导。在鼠伤寒沙门氏菌的完全普遍转导实验中，曾以其野生型菌株作供体菌，营养缺陷型为受体菌，P22噬菌体作为转导媒介。当P22在供体菌内发育时，宿主的染色体组断裂，待噬菌体成熟之际，极少数噬菌体的衣壳将与噬菌体头部DNA芯子相仿的供体菌DNA片段误包入其中，因此，形成了完全不含噬菌体本身DNA的假噬菌体（一种完全缺陷的噬菌体）。然后假噬菌体的DNA可重组到受体菌染色体上，所以形成了遗传性稳定的转导子。 简称流产转导。在许多获得供体菌DNA片段的受体菌内，如果转导DNA不能进行重组和复制，其上的基因仅经过转录而得到了表达，就称流产转导。当这一细胞进行分裂时，只能将这段DNA分配给一个子细胞，而另一子细胞只获得供体基因的产物—一酶，因此仍可在表型上出现供体菌的特征。 局限转导：指通过某些部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中的转导现象。当温和噬菌体感染受体菌后，其染色体整合到细菌染色体的特定位点上，从而使宿主细胞发生溶源化。如果该溶源菌因诱导而发生裂解时，在前噬菌体插入位点两侧的少数宿主基因会因偶尔发生的不正常切割而连在噬菌体DNA上（当然噬菌体也将相应一段DNA遗留在宿主染色体上），两者同时包入噬菌体外壳中。局限转导又可分为低频转导和高频转导两种 当温和噬菌体感染其宿主而使之发生溶源化时，因噬菌体的基因整合到宿主的基因组上，而使后者获得了除免疫性以外的新性状的现象，称为溶源转变。当宿主丧失这一噬菌体时，通过溶源转变而获得的性状也同时消失。溶源转变与转导有本质上的不同，首先是它的温和噬菌体不携带任何供体菌的基因；其次，这种噬菌体是完整的，而不是缺陷的。 通过供体菌和受体菌完整细胞间的直接接触而传递大段DNA的过程，称为接合（有时也称“杂交”）。主要在大肠杆菌中发现。 通过人为方法，使遗传性状不同的两细胞的原生质体发生融合，并产生重组子的过程，称为原生质体融合或细胞融合。这是近年来才出现的继转化、转导和接合之后的转移遗传物质的又一重要手段。 能进行原生质体融合的细胞不仅有原核生物中的细菌、放线菌，而且还有真核微生物中的酵母、霉菌以及高等动、植物细胞。 基本步骤：细胞去壁，加入促融合剂PFG（聚乙二醇）促进融合，然后培养、鉴定。 (1) Transformation, which involves donor DNA free in the environment (2) Transducti