工业淀粉酶地纯化与分析报告试验报告材料.docVIP

实用标准文案 精彩文档 工业淀粉酶的纯化与分析 实验目的 掌握盐析法纯化分离蛋白质的工作原理和方法 掌握利用葡萄糖凝胶层析法进行蛋白质脱盐的技术 掌握测定淀粉酶活力的基本原理和方法 学习Folin-酚比色法测定蛋白质含量的原理和方法 实验原理 工业淀粉酶含有大量杂质将其溶解浸提后离心，利用高浓度的硫酸铵溶液将上清液的蛋白质沉降下来，所得沉淀溶解后即为盐析液。 利用葡糖糖凝胶G-25对大分子量蛋白质和小分子盐类的阻滞作用不同，从而经凝胶层析使盐析液中的蛋白质和盐类分离。 酶活力是以酶在最适条件下，催化一定化学反应的初速度来表示的。在本实验中，是以一定量的淀粉酶在37摄氏度，PH=6.8的条件下，每分钟水解淀粉酶生成1mg还原糖的量为一个酶活力单位，其中还原糖的量用DNS法测定。 蛋白质在Folin-酚试剂的作用下生成钨蓝和钼蓝，测定其在500nm波长下的吸光度 ，从而求得样品中蛋白质的含量。 实验材料及仪器设备 材料：工业淀粉酶 仪器：电子天平；离心机；UV9100型分光光度计 恒温水域；沸水浴 器材：刻度试管：25ml*21；移液管：1ml*6、5ml*1；烧杯：250ml*2、50ml*1; 研钵：一套；移液枪：一套；离心管：100ml*1;1.5ml*4;7ml*1;注射器：1