红千细胞酶缺乏症.pptVIP

[临床意义] ①G-6-PD缺乏者荧光很弱或无荧光，出现荧光点的时间＞ 30分钟 ②在G6PD缺乏症高发人群中，对阵发性溶血而抗球蛋白试验和酸溶血试验阴性者，应考虑有本病的可能。网织红细胞增加可致假性G6PD活性增加。 [评价] ①本方法直接测定NADPH的量， 有较强的特异性和敏感性，但仍需20%-30%的G6PD缺乏红细胞才能得出异常结果。 ②实验方法要求严格，试剂昂贵，需恒温分光光度计。 ③网织红细胞含有高浓度的G6PD ，如患者最近发作过溶血，应将标本离心后取底层红细胞检测。 ④血红蛋白对荧光有淬灭作用，HCT50%时，应取标本的半量检测，20%时，取标本的两倍量做检测。 丙酮酸激酶缺陷症 ?一、疾病概述 红细胞丙酮酸激酶(pyruvate kinase, pk)缺乏症是一种常染色体隐性遗传性溶血性疾病。 发病率仅次于G6PD缺陷症，但在我国少见。 患者红细胞的丙酮酸激酶(PK)缺乏使ATP生成不足，导致细胞能量代谢障碍。 最明显的是红细胞膜的离子通透性增加，细胞体积变小，成为皱缩、僵化红细胞，易于被脾或肝内巨噬细胞破坏而发生溶血。 二、临床表现 丙酮酸激酶缺乏症严重者可在婴儿早期即出现症状，为中度以上的贫血、黄疸，需反复多次输血才能存活。 多数患者表现终身存在的慢性溶血性贫血，伴黄疸，部分患者会发生胆石症。 极少数患者由于溶血被代偿而不表现贫血。 新生儿的PKD常常发生高胆红素血症 三、诊断方法 [病史]? 　　自幼发病，终身存在慢性溶血表现。 [体格检查] 　　贫血、黄疸的轻重常与病情的严重程度有关。可 有脾肿大。 诊断评析 1．丙酮酸激酶缺乏症分为遗传性和继发性两种，本诊断标准主要用于遗传性丙酮酸激酶缺乏症。 2．在临床如只有PK酶活性改变，无溶血表现者，则为红细胞PK缺乏。 3. 临床高度怀疑PK缺乏，而PK活性测定正常时，应进行底物系统的 PK活性定量测定 4．继发性的丙酮酸激酶缺乏症见于白血病、红白血病、再生障碍性贫血、难治性贫血及化疗后，常应有这些疾病的临床表现。 实验室检查 血常规检查? 血红蛋白接近或低于正常值；网织红细胞计数增高；外周血涂片镜检可见大红细胞、皱缩红细胞或棘状红细胞。 红细胞PK活性测定显示PK活性的降低荧光斑点法PK活性筛选试验呈中间缺乏或严重缺乏值。 PK活性定量测定：正常值15．0土1．99u／g Hb(37℃)。中间代谢产物(ATP、2，3 DPG、PEP等)测定。 二、丙酮酸激酶缺乏的检验方法 丙酮酸激酶荧光斑点试验 丙酮酸激酶活性检测 [原理]在二磷酸腺苷（ADP）存在的条件下丙酮酸激酶（pyruvate kinase,PK）催化磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）转化成丙酮酸，在辅酶Ⅰ还原型（NADH）存在的情况下，丙酮酸被LDH转化为乳酸，若标记荧光于NADH上，此时有荧光的NADH变为无荧光的NAD。在340nm波长下，检测NADH减少的速率，可定量推算PK活性。 [参考值]正常人丙酮酸激酶活性荧光斑点在25min内消失，酶活性（15.0 ?1.99)U/gHb。 [临床意义] ①荧光斑点不消失或时间延长说明丙酮酸激酶活性缺乏，中间缺乏（杂合子）时，荧光在20 ∽60min内消失 ，纯合子60min不消失 ②杂合子PK缺乏症病人为正常人的25% ∽50%，纯合子PK缺乏病的病人，为25%以下。 ③口服避孕药，代谢性肝病，急性白血病，再生障碍性贫血可致获得性PK的缺陷。 [评价] 红细胞PK活性测定是诊断丙酮酸激酶缺乏症直接和可靠的证据，但检查方法比较复杂。Hb Ret同G6PD。 谢 谢 第十一章 红细胞酶缺乏症 第一节 概 述 红细胞代谢 葡萄糖代谢 铁代谢 红细胞核苷酸代谢 红细胞要有效维持其正常生理功能，必须保证一定的能量代谢，红细胞能量代谢的主要作用： ①维持血红蛋白内的铁处于2价铁形式 ②维持红细胞内的高钾、低钠、低钙状 态 ③ 维持红细胞内酶、血红蛋白中的巯基团处于激活和还原状态。 ④维持红细胞的双凹形态。 葡萄糖代谢 红细胞的正常能源是葡萄糖。 红细胞内葡萄糖的分解代谢主要有两个途径，即无氧糖酵解和磷酸己糖通路。 成熟红细胞仅靠葡萄糖的无氧酵解获取能量。 1、无氧糖酵解 （90%-95%） 在葡萄糖的无氧酵解途径中，葡萄糖分解为丙酮酸或乳酸。 代谢1mol的葡萄糖分解可净获得2molATP。 葡萄糖的利用率主要受限于己糖激酶和磷酸果糖激酶所催化的反应。 其代谢产物NADH是MHb酶的辅酶，维持血红蛋白分子中的铁处于还原状态，保持血红蛋白的携氧能力。 酶缺乏（如PK），导致溶血. 2、2，3-二磷酸甘油酸（2，3-DPG)代谢支路