第四章病特毒遗传分析.pptVIP

第四章 病毒的遗传分析 ;Background;二、细菌和病毒的拟有性过程;第一节 噬菌体的繁殖和突变型;（二）温和性噬菌体的感染周期 温和性噬菌体具有溶原性（lisogeny）的生活周期。这类噬菌体侵入细菌以后，细菌细胞并不马上裂解。 温和性噬菌体有两种类型。 （1）以λ为代表 （2）P 1 噬菌体 裂解周期： 溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌 ↓释放 子噬菌体。 ;Structure of T4 bacteriophage;T4病毒粒子含有线形双链DNA，基因组长度166kb(千碱基对)；?其基因组DNA含5-羟甲基胞嘧啶以代替胞嘧啶，而且羟甲基是葡糖化了的。 T4?DNA聚合酶是在生物中发现直接参与DNA复制的第一种酶。 ;二、遗传图谱;三、研究方法 1、噬菌斑 2.一步生长曲线试验 3. 单菌释放实验;噬菌体生长的测定——一步生长曲线;四、基本术语 1.涂布效率（e.o.p）=噬菌斑/感染噬菌体颗粒数 2.感染复数m=噬菌体颗粒数/细菌数量 3.裂解量—每个被感染细菌释放新的噬菌体的平均数 ;;;;一、 噬菌体的突变型;Benzer所用 T4的 r II突变就是遗传学研究中所用的第一个条件致死突变型。 T4噬菌体有多个迅速裂解突变型，分别称为 rl， r II，rIII等，它们位于 T4染色体 DNA的不同区段，这 3组突变型由于在大肠杆菌不同菌株上的反应不同可以相互区别。 　 T4 r II突变使所侵染细胞迅速裂解形成大噬菌斑，所以称为 r II突变型。 ;（二)宿主范围突变型（h）：突变率为10-6，不同的菌株中突变性不一样。 ;(三) 条件致死突变型 1 温度敏感突变型 2 抑制因子敏感突变（sus） 噬菌体 细菌 正常基因 sus+ su- 突变基因 sus su+ ;（1）抑制因子敏感突变的概念： 例如：噬菌体mRNA基因 细菌tRNA基因反密码子 正常 突变 突变 正常 基因：5`TAC 3`?5`TAG 3` 3`ATC 5`?3`ATG 5` ? ? ? ? mRNA 5`UAC 3` 5`UAG 3` 3`AUC 5` 3`AUG 5` ? ? 表型：酪氨酸 终止 5`UAG 3`;表5-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现;（四）无义突变与无义抑制突变;第三节 噬菌体突变的重组试验;二 T2突变型的两点试验;三 T4突变型的三点试验;第四节 噬菌体突变型的互补试验;2.1 互补测验原理和方法 基础遗传学研究首先须有突变型，然后分析突变型间的关系。重组测验与互补测验是确定这种关系的两个基本方法。 　　重组测验以遗传图距确定突变的空间关系，而互补测验则是确定突变的功能关系。 　　;　　如 rII区有 3 000多个突变型都有相同表型. 这些突变型对E.coli K(λ)寄主细胞致死，但可在E.coli B菌株细胞中增殖。 既然它们有相同表型，是否它们都影响同一种遗传功能？rII中这3 000多个突变型是属于一个基因还是属于几个基因？为划分这种功能单位界线，要进行互补测验。;　　用不同rll突变型成对组合同时感染大肠杆菌K(λ)菌株： 　　如果被双重感染的细菌中产生两种亲代基因型的子代噬菌体，那么必然是两个突变型称彼此互补（complementation）。 如果双重感染的细菌不产生子代噬菌体，那么这两种突变型一定有一个相同功能受到损伤。;该方法测定重组频率极敏感，重组检出率达1/106，理论上可测得0.002%的重组值，实际上所观察的最小重组频率为0.02%。根据二点杂交的结果，可作成连锁图 。 ;　　互补测验结果发现，rII突变型可分成 r IIA和 r IIB两个互补群。 　　 　　凡属rIIA的突变之间不能互补；同理属于rllB的突变之间也不能互补，只有rIIA的突变和rllB的突变间可互补，双重感染E.coli K(λ)菌株后可产生子代。 　　 说明 r 11A和 r 11B是两个独立的功能单位，分别具不同的功能，但它们又是功能互补的，要在.coliK(λ )菌株中增殖，两种功能缺一不可。可见r II是由于这两种遗传功能丧失而成的。;2.2