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小檗碱的研究进展 小檗碱能抑制细菌内糖代谢过程中的丙酮酸氧化，使细菌对维生素B6 和烟酰胺等的利用受限制，产生抑菌作用 （李仁利，2004）。 小檗碱能通过抑制细菌内的DNA、ＲＮＡ、蛋白质和类脂的合成，从而干扰细菌的繁殖（张明发，2003）。 小檗碱的研究进展 孟甄等（2003）用含新霉素、小檗碱等的培养基连续传代培养大肠杆菌，结果在含新霉素条件下很容易出现耐药性菌株，而小檗碱组则没有出现耐药性菌株。 小檗碱对肠道对肠道常驻菌有弱抑制作用，其中对有害肠菌有较强的的抑制作用，而对乳酸菌等肠道常驻菌抑制作用较弱（Chae,1999）。 小檗碱的研究进展 断奶仔猪日粮中添加三颗针提取物（有效成分主要为小檗碱）能减少仔猪腹泻、提高仔猪生长性能，达到或超过添加土霉素的促生长效果；与添加抗生素相比，三颗针提取物能改善断奶仔猪的免疫力，提高仔猪的特异性免疫和非特异性免疫机能，调节仔猪的肠道菌群，增加肠道乳酸杆菌和厌氧菌的数量，降低大肠杆菌和需氧菌的数量，提高肠道VFA的浓度（刘岭，2006）。 小檗碱的其他药理作用 小檗碱及其衍生物药理功能十分丰富，除抗菌、抗疟等活性外，小檗碱及其衍生物还具有抗病毒、治疗肿瘤、心血管疾病、降糖、调脂等多方面药理活性作用（张韶湘等，2007）。 试验期管理 试验仔猪除接受处理日粮外，其他饲养管理、日常消毒和免疫程序均按规模化猪场统一执行。 测定指标 小檗碱的药理作用 杨庆珍（2015）对小檗碱的药理作用研究进展进行了统计，见下表2 （杨庆珍，2015） 研究目的与意义 在实际生产中，断奶仔猪处于断奶（心理）、更换饲料（营养）双重应激，也是疫苗的集中免疫期和疾病的多发期。本试验通过在断奶仔猪饲料中添加小檗碱，研究其对仔猪肠道区系的影响，以期评估小檗碱作为潜在新型饲料添加剂的价值。 二、研究内容 在21日龄断奶仔猪日粮中添加小檗碱，研究小檗碱对断奶仔猪肠道区系的影响。 通过对试验仔猪血清生理生化指标、腹泻率、腹泻指数、肠道HE染色肠绒毛高度、肠道微生物区系（高通量测序）的分析，评估小檗碱在断奶仔猪日粮中使用价值。 三、技术路线 40头仔猪随机分为A、B、C、D四组，每组10头 A组仔猪不断奶 B组21日龄断奶日粮不加小檗碱 另外C、D两组分别在日粮中添加高、低两个浓度的小檗碱 试验期2周，测定指标：血清生理生化指标，腹泻率，腹泻指数，肠道HE染色肠绒毛高度，肠道微生物区系（高通量测序） 四、试验方案 选取40头杜×（长×大）仔猪，随机分成4个处理组，每个处理组10头仔猪。分组情况如下： 处理组一：21日龄不断奶； 处理组二：21日龄断奶，仔猪基础日粮不加小檗碱； 处理组三：21日龄断奶，仔猪基础日粮加低剂量小檗 碱(300mg/kg)； 处理组四：21日龄断奶，基础日粮加高剂量小檗碱 (500mg/kg)。 试验期14天。 测定指标 在试验期第7d和14d每组随机抽取3头仔猪屠宰。采血，采集10ml血样，室温下静置3-4h后3500r/min离心15min，制备血清-20℃保存备用；取肠道内容物和小肠组织样样品于-80℃保存。 测定指标 2、腹泻率 每天8:00时定时观察仔猪粪便情况，粪便分为正常、稀软、粘稠、水样和血便5各等级，后四个等级为腹泻，记录每组腹泻头次。 腹泻率 = 试验期 腹泻仔猪 头次 ／ ( 试验仔猪头数×试验天数 )×100 ％ 1、血清生理生化指标 对血清样品进行血常规测定。 测定指标 3、腹泻指数 M.Castillo,2008 5、肠道微生物区系 对肠道内容物样品进行高通量测序，分析肠道菌群区系。 4、肠道HE染色长绒毛高度 各肠段样本采用石蜡切片，苏木精-伊红染色，在光学显微镜下进行观察、采图和测量小肠绒毛高度。 五、研究进度安排 2016.03~2015.9