植物组织培只养实验指导.docVIP

PAGE PAGE 5 《植物组织培养》实验指导 教师：任峻 目 录 实验一 参观植物组织培养实验室 实验二 培养基母液配制 实验三 培养基配制与灭菌 实验四 植物快速繁殖培养 实验考核 一、课程的性质与任务 植物细胞工程实验技术一般包括植物细胞组织离体培养技术、细胞融合技术、细胞拆合技术、外源基因转移技术等一系列重要的基础技术。通过实验课程的学习，实验方法立足于初学者的专业基础和一般实验室的条件，将《植物细胞组织培养技术》课程的理论知识、一般的实验技能和科学研究的初步方法融为一体。培养学生理论联系实际、独立思考及实践动手能力。 二、实验的目的与基本要求 通过本课程的学习使学生掌握植物细胞工程技术的基本原理和实验操作方法，掌握植物细胞体外培养技术，结合科研和生产实际，提高学生分析问题、解决问题的能力。以适应今后在教学、科研和生产开发等各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。 在实验教学过程中，要求学生学习态度严谨，操作动作规范，观察记录耐心细致，独立思考，综合分析实验结果，充分理解后认真地完成实验报告。 09本《植物组织培养》实验考核 一、考核方式：实验操作。 二、考核时间： 三、考核地点： 四、监考教师： 实验考核以实验操作形式进行，根据实验4或实验5实验的实验结果（失败或成功）决定实验方案，如果失败，分析失败原因，提出改进措施，在重做中进行实验操作考核，如果成功则继续下一步的实验，实施实验操作考核。 二．考核办法：考核方法主要观察学生的实验操作是否正确，污染率是否高，并要求学生写出实验报告，总结实验中常出现的问题。在3个课时内小组协作完成实验内容。包括以下几个方面： 1．对实验仪器设备的选择及操作。 湿热灭菌操作过程；无菌操作过程。 2.培养基的配制 试剂的配制；母液的移取；实验配方计算。 3.培养条件的设置。 4.实验报告的规范性与科学性。 实验一 参观植物组织培养实验室 一、实验的目的和要求 掌握植物组织培养实验室的设计要点和必备的仪器设备。 二、实验内容： 1. 植物组织培养实验室的设计要点。 2. 植物组织培养实验室必备的仪器设备。 三、需用的仪器或试剂 四、实验步骤 五、教学方式：参观。 六、考核要求：每小组对植物组织培养实验室各功能室的仪器设备进行有效配置。 七、实验报告要求 1.认真观察，如实记录：记录参观实验室所用的设备。 2.说明准确，层次清晰 3.格式规范，表述科学：用简图表示植物组织培养实验室的设计。 实验二 培养基母液配制 一、实验的目的和要求 1.了解植物外植体离体培养所需各种营养成分及激素种类 2.?初步掌握培养基母液配制方法 二、实验内容： 母液配制方法，以MS培养基为例。?????????????????????????????? 1．无机大量元素母液的配制 按培养基配方的需要量，将各种化合物称量扩大10倍，用粗天平称取，并分别用200ml蒸馏水溶解于400ml烧杯中，如溶解速度慢，可稍加热。在1000ml烧杯中，按表1-1顺序依次混合已熔化合物溶液并搅拌，以免产生沉淀，用量筒定容至1000ml，倒入试剂瓶中并贴好标签。保存于冰箱冷藏室待用。 ? 表1-1???? MS无机大量元素母液配制????????? mg/L?? 化合物名称???? 培养基配方用量??????? 扩大10倍称量??????????? 备注 ?KNO3???????????? 1900??????????????????? 19000???? ???定容于1000ml蒸馏 NH4 NO3?????????? 1650?????????????????? 16500??????? 水中。每升培养基取 MgSO4 ·7H2O??????? 370??????????????? ????3700??????? 此液100ml KH2 PO4??????????? 170??????????????????? 1700???? CaCl2·2H2O????????? 440??????????????? ????4400 2．无机微量元素母液配制 按培养基配方需要量，将各种化合物扩大10倍，用电子天平称取，并分别用50ml烧杯20ml蒸馏水溶解，在100ml烧杯中将上述溶液依次混合，用100ml量筒定容（药品已浓缩100倍），倒入试剂瓶中并贴好标签，保存于冰箱中。 表1-2???? MS无机微量元素母液配制????????? mg/L 化合物名称??? 培养基配方用量???? 扩大10倍称量?? ???? 备注 ??? ???MnSO4 ·4H2O???????? 22.3????????????? 223???? 定容于100