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专题一 微生物的培养与应用; 了解有关培养基的基础知识,进行无菌技术的操作,进行微生物的培养。;一、微生物基础知识;(二)培养基;2.培养基内所含的基本物质(4种);(1)pH值
如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性
(2)特殊营养物质---- ?
如:培养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素
(3)氧气的含量
如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件; 小结:不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方 (参考教材附录3内容)。 不管哪种培养基,一般都含有水、碳源、和氮源、 无机盐、等营养物质,另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需,而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
;(三)无菌技术;(2)灭菌;干热灭菌
160-170℃ ;1-2h;二、实验操作;三、课题延伸:菌种的???藏;再 见;倒平板;讨论:;;(1).为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?
(2).在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?
(3).在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?;2.稀释涂布法:;涂布平板操作;返回;(2)碳源;(3)氮源;练习1(多项选择);思考:;?;思考2;练习2:; 4.某学校打算开辟一块食用菌栽培基地,以丰富学生的劳动技术课内容,首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理,准备食用菌栽培所需的各种原料和用具,然后从菌种站购来各种食用菌菌种.请回答以下问题:;(3)将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞后包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入 中灭菌,压力为 ,温度为 ,时间 ,灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力 ,将试管取出.
(4)使用高压蒸汽灭菌锅时注意,先向锅内倒入 ,把锅内水加热煮沸并将基中原有冷空气彻底排除后将锅密闭.
(5) 从一支试管向另一支试管接种时注意,接种环要在酒精灯 焰灭菌.并且待接种环 后沾取菌种,试管口不能离开酒精灯火焰附近,将接种的试管放入 ℃冰箱中保藏.;; 根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的。
合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。
优点:标准化生产,组分和含量相对固定;成本低
缺点: 缺少某些成分,不能完全满足体外细胞生长需要。 ; 天然培养基有血清、血浆、和组织提取液(如鸡胚和牛胚浸液)。
优点:营养成分丰富,培养效果好
缺点:来源受限;成分复杂,影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;;血清中含有:
①多种蛋白质(白蛋白、球蛋白、铁蛋白等)
②多种金属离子;
③激素;
④促贴附物质,如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。
⑤各种生长因子
⑥转移蛋白
⑦不明成分;液体培养基:(增菌);固体培养基:(纯化,增菌, 形成菌落,菌苔)
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