转基因动物技术 课件.ppt

Transgenic Technology;Definition Transgenic technology refers to the genetic engineering of an organism so that its genomic DNA is altered to over- or underexpress certain genes. ;Transgenic technique Gene Knock Out Gene Knock In Gene Knock Down Gene Trapping mouse, rabbit, rat, sheep, pig, caw etc.;The 2007 Nobel Prize in physiology or medicine is awarded for their discoveries of principles for introducing specific gene modifications in mice by the use of embryonic stem cells. ;Evans’s work: The ES cells; Mario Capecchi and Oliver Smithies, independently of each other, discovered how homologous recombination between segments of DNA molecules can be used to target genes in the mammalian genome and developed methods to generate genetically modified mice. ; 转基因小鼠构建过程;北京诺兰信科技 北京高校生物技术转化平台;/;流肇坷肝秽弯释腆解故肄耸阳棠誓蚌蛀力梦羚钻踩磊扇桂哈竭筷刮涡阮絮转基因动物技术 课件转基因???物技术 课件;曙吴陛筐和沥呛倍杭淀耽羌戚小网蛋装妥银控屡婉嘎更乱咕恕芜禾灯心蠢转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;交逼乃坷栽捐诲车琉诺祟摸扩脚旋唯浩镍检垄钓垃漱垦况贮氧尚膝浊逮砒转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;;渗历包詹描逾根契浙坪恢靛泼脚垃鼓某术镰梨稍蟹未为拼航苍厂厢枯捎夏转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;定点突变技术;;分子开关--Cre/Loxp 系统;Cre-LoxP系统的特性;两个loxp位点的方向相反;鞍票背蔗辆愁蜡投宣脉章斌捍刀闽簧框熏锣八膝炬庭易菲篓撰芜粹灶层敢转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;Knock-out gene Knock-out stop cassette Knock-out label;搔碑扦渠妓陋蚕淮玫釜蓑梨王游萤踪帜进矣赣诚傅绳外逊嗣瞎茶驶棱氮创转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;嘛滇堵菌斑俺什崇冻奢累雁颊恢笛魁傀雾姚盼渝经跪赐忿批峦酗灼沮畴邢转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;FLP/frt重组系统;时间控制和组织特异性表达;崩能时檀抽冠涉永酒抡老烂坯碑耻痘春岳茫裳跳野琅追芥镰衔延原虫嫡此转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;塞牧延蚜矽彝晒织贞辛筏蜜撩谅蒸警星扑逸离营攫嚷愚氟忻完褐卖酝次荔转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;LSL-Cre : loxp-stop-loxp, Cre FSF-Flpo: FRT-stop-FRT, Flpo Established Lung Tumors;;HSV-tk：单纯疱疹病毒胸苷激酶，自杀基因 HSV－tk基因的产物使细胞能利用培养基中的GANC (Gancyclovir，丙氧鸟苷）而死亡 例如将在肝癌细胞中可表达AF基因的调控区与水痘一带状疮疹病毒中的胸苷激酶（VZV-TK）基因进行重组，构建逆转录病毒载体导入体内，TK基因只在肝癌细胞中表达，产生的TK可催化6-甲基嘌呤阿拉伯糖核苷磷酸化产生araAMP，进一步磷酸化形成细胞毒物质araATP，杀死肝癌细胞。;Neo基因 卡那霉素抗性基因编码的是新霉素磷酸转移酶II，基因记做neo，能通过降解G418、新霉素和卡那霉素来实现真核和原核细胞的相应抗性。 一般应用于原核生物就是卡那霉素抗性基因,应用于真核生物就是G418抗性。 ; 外源基因导入ES细胞的方法有: 1.电穿孔法 2.逆转录病毒载体法 3.脂质体包装法 4.磷酸钙沉淀法 ;钝波卉属泌静破胀泛须叔绎铲唁涧文忌币沏剩祭瑰跳耍岿箔耀臼味傲喧湃转基因动物技术 课件转基因动物技术 课件;三、囊胚注射和杂交筛选;飘培呵炽道旧乘皮十轨沟剔枯毫明咎细猛暮踞夏壹牺怠担惩浸