最新 高中生物 专题一 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序课件 新人教版选修3--复习下载.ppt

2.个体水平鉴定 包括抗虫、抗病的 实验，以确定是否有抗性及抗性程度。基因工程产品需要与天然产品活性进行比较等。 接种 预习诊断 判断正误： (1)所有的目的基因都可从基因文库中直接获得。(　　) (2)利用PCR技术能合成目的基因。(　　) (3)标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。(　　) (4)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法。(　　) × × √ √ (5)一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种。(　　) (6)基因表达载体中需要含有起始密码、终止密码、目的基因、标记基因。(　　) (7)常用卵细胞作为动物的受体细胞。(　　) (8)检测转基因生物的染色体上是否插入了目的基因是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。(　　) (9)检测目的基因是否转录出mRNA是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。(　　) √ × × √ √ 一、目的基因的获取 课堂讲义 重点难点，个个击破 1.几种获取目的基因方法的比较 方法 基因文库的构建 PCR技术扩增 人工合成 基因组文库 部分基因文库 (如cDNA文库) 过 程 优点 操作简单 专一性强 可在短时间内大量扩增目的基因 专一性强，可产生自然界中不存在的新基因 缺 点 工作量大、盲目性大、专一性差 操作过程较麻烦，技术要求过高 需要严格控制温度、技术要求高 适用范围小 2.PCR技术与DNA复制的比较 比较项目 DNA复制 PCR技术 区别 解旋方式 解旋酶催化 DNA在高温下变性解旋 场所 细胞内(主要在细胞核内) 细胞外(主要在PCR扩增仪中) 酶 解旋酶、DNA聚合酶 耐热的DNA聚合酶 温度 细胞内温和条件 控制温度，需90 ℃～95 ℃高温 结果 合成DNA分子 合成DNA片段或基因 联系 (1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板 (2)原料：均为四种脱氧核苷酸 (3)酶：均需DNA聚合酶 (4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 思维激活 1.基因组文库和部分基因文库有什么区别？ 答案　基因组文库包含一种生物的全部基因，部分基因文库只包含一种生物的一部分基因。 2.怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因呢？ 答案　根据目的基因的有关信息，例如，根据基因的核苷酸序列、功能、在染色体上的位置、转录产物mRNA以及基因表达产物蛋白质等特性来获取目的基因。 3.PCR过程中需要解旋酶吗？所需要的DNA聚合酶应具有什么特点？ 答案　PCR过程中，DNA双链解开是在高温下完成的，不需要解旋酶；由于PCR过程温度较高，所以需要能耐高温的DNA聚合酶。 4.什么样的基因适合用DNA合成仪直接人工合成？ 答案　基因比较小，核苷酸序列又已知。 应用示例 1.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是(　　) ①从基因文库中获取目的基因　②利用PCR技术扩增目的基因　③反转录法　④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成 A．①②③④ B．①②③ C．①②④ D．②③ 问题导析 (1)PCR利用的是 原理，将双链DNA之间的 打开，变成 DNA，作为聚合反应的模板。 (2) 则是以目的基因转录成的信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下，先反转录形成互补的单链DNA，再合成双链的DNA。 则均不需要模板。 答案　D DNA双链复制 氢键 单链 反转录法 ①、④ 一题多变 判断正误： (1)目的基因可以从自然界已有物种直接分离，也可人工合成。(　　) (2)目的基因就是指编码蛋白质的基因。(　　) (3)真核生物的基因中含有内含子，因此常用反转录法获取目的基因。(　　) (4)利用DNA合成仪可以在短时间内大量扩增目的基因。(　　) × × √ √ 二、基因表达载体的构建与转化 1.基因表达载体的构建步骤 (1)一般用同一种限制酶切割目的基因和质粒，使其产生相同的末端。 (2)将切下的目的基因片段插入质粒的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成一个重组DNA分子(重组质粒)。构建过程如图： 特别提醒：该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用上了，是最核心、最关键的一步，在体外进行。 2.将目的基因导入受体细胞的方法比较 细胞类型 方法 说明 特点 植 物 细 胞 农杆菌转化法 目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→通过农杆菌→进入植物细胞→插入到植物细胞中的染色体DNA上→目的基因表达 经济、有效，适合于双子叶植物和裸子植物 基因枪法 目的基因包裹在微小的金粒或钨粒表面→用基因枪高速射入到受体细胞或组织中→目的基因表达 成本较高，是单子叶植物中常用的基因转化方 植物细胞 花粉管通法 含目的基因的溶液→滴加在柱