巴斯德毕赤酵一母表达系统.pptVIP

巴斯德毕赤酵母表达系统 报告人：彭平平 起源及背景 巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统是8O年代初被开发和研制的一种新型酵母表达系统。 30年前Koichi Ogata首次发现有些酵母可以利用甲醇为唯一的碳源和能源. 70年代Philips pertoleum公司就开发出高密度连续发酵生产毕赤酵母的工艺(细胞干重130g/L)。 80年代由Philips pertoleum公司合作开发毕赤酵母表达外源基因的研究。研究人员分离了醇氧化酶（AOX）的基因和启动子，构建了载体和菌株，开发了毕赤酵母基因操作的相关技术。 1993年Philips pertoleum公司委托Invrtigone公司代理毕赤酵母表达系统的产品。 毕赤酵母与其它表达系统相比 有许多优点 1、毕赤酵母是需氧酵母菌，在有氧条件下能高密度生长，因此有利于扩大生产获得高浓度细胞，从而进行高效表达 2、通过质粒整合到毕赤酵母基因组的外源基因结构稳定，不易丢失；且外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中，能够筛选到高表达菌株 3、毕赤酵母甲醇氧化酶(alcohol oxidase，AOX)基因的强启动子特别适用于外源基因的调控表达 4、毕赤酵母自身分泌到培养基中蛋白很少，使得分 泌性的外源蛋白容易从培养基的基质中分离 5、毕赤酵母对外源蛋白产物进行N