琼脂糖凝胶电泳离检测dna.pptVIP

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  • 2019-01-11 发布于福建
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琼脂糖凝胶电泳离检测dna

* * 紫外透射检测仪 * * * * Tris-硼酸(TBE) Tris-乙酸(TAE) Tris-磷酸(TPE) DNA的泳动受到电泳缓冲液和离子浓度的影响。 缺乏离子,电导率严重降低,电泳迁移率很慢;离子强度过高,电导率升高,极易产生大量的热能,最严重的结果是凝胶熔化,DNA变性 常用的电泳缓冲液有TAE,TPE和TBE,其中TAE的缓冲容量最低,长时间电泳将被消耗。 * * * * * * (配制浓度依照所提质粒的大小来确定). 配制多大浓度的琼脂糖凝胶,要根据被检的DNA分子大小来确定。 * * * * * * * * * 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 丁新伦 dingxinlun@163.com【一】背景知识 凝胶电泳是分离和纯化DNA片段最常用的技术; 分离、鉴定和提纯核酸首选的标准方法。 根据制备凝胶的材料: 琼脂糖电泳 凝胶 电泳 聚丙烯酰胺电泳 【二】实验目的 学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法 检测碱裂解法提取质粒的结果 检测双酶切法鉴定重组质粒的结果 检测PCR法鉴定重组质粒的结果 【三】实验原理 (1)某物质在电场作用下的迁移速度叫做电泳的速率,电泳的速率与核酸分子大小和构型有关。 DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷,在外加电场作用下向正极泳动。分子质量越小跑得越快,紧密构型快于松散型开环

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