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幽门螺杆菌检来查方法

幽门螺杆菌检查方法 金哲 分类 临床诊断方法分类 无创检查 血清学方法、同位素标记尿素的呼气试验、胃液PCR 创伤性检查 形态学、微生物学、分子生物学技术 原理 微生物学方法、血清学方法、尿素酶依赖技术、形态学方法、基因诊断 一、微生物学方法 主要为细菌分离培养技术,诊断Hp感染的“金标准” 获得抗原制备、药敏试验、分型和致病性研究等所需的细菌 要求具有一定的厌氧培养条件和技术,作为常规诊断手段不易推广 二、血清学方法 1、ELISA检测:检测外周血中Hp全菌及其组分(细胞毒素的抗体),主要用于不同人群中Hp感染情况的流行病学调查和根除治疗后较长期(﹥3月)的复查 一般不单独用作医院病人Hp感染和根除(治疗后一个月)的诊断依据 操作复杂但方法日益标准化,商品化试剂大大简化了技术难度,但需昂贵的酶标仪 二、血清学方法 2、免疫酶试验 用固定于玻片中的Hp菌,与病人血清中的Hp抗体结合,经酶标二抗显色镜检进行诊断 操作简便,不需要特殊仪器,但准确性稍差,判断需要经验 二、血清学方法 3、胶乳凝集试验 用结合在胶乳颗粒上的Hp检测微量血中的抗体 优点是不需仪器,血样需量少 但结果 需要经验且准确性不满意 二、血清学方法 4、Western-blot 主要用于分析感染者血中对Hp多种抗原组分的抗体产生情况 可以控制抗原制备质量和分析与其他类似菌的交叉反应 但操作复杂,技术难度大且不稳定,不作常规诊断方法 由于Hp感染数周后血中才出现特异抗体,阴性者血中也可存在交叉反应抗体(如空场弯曲菌感染),且Hp根除后血中抗体可长时间(﹥6个月)维持在阳性水平,故血清学阳性不能完全肯定病人有活动性感染;阴性不能排除初期的感染。因此,血清学抗体的检测只能用于流行病学筛查,而不能用于临床诊断 三、尿素酶依赖技术 1、呼气试验 用13C或14C同位素标记尿素让病人口服后被Hp尿素酶分解,产生13CO214CO2,阳性者可在呼出气中检测出13C 丰度和14C活性,从而确诊Hp感染 13C试验: 优点:准确,特异,快捷,无创伤,无放射性 缺点:仪器价格昂贵 三、尿素酶依赖技术 2、15N-尿氨排出试验 病人口服15N-尿素后,测定尿液中的15N丰度 优点:非侵袭性,无放射性,有一定定量意义,敏感性与特异性极高,能克服胃活检标本局限性 缺点:设备昂贵 三、尿素酶依赖技术 3、快速尿素酶试验 原理:根据试剂pH值变化引起颜色变化来判断Hp感染状态 操作简便易行 标本中细菌数104以上时才能显示阳性,而标本的大小、反应时间、环境温度,观察者主观因素等均可影响结果 四、形态学方法 组织切片染色,组织学染色,免疫组化染色 可在显微镜下直接观察细菌,可进行胃粘膜的病理学诊断 需要胃镜检查和观察者经验 五、基因诊断 插胃管吸取胃液或胃镜下取胃液或活检组织,提取DNA做PCR扩增和探针杂交诊断Hp感染 准确性好,检测灵敏度高 操作复杂,易污染,费用高,不宜作为常规检查方法 各种诊断方法优缺点 * * 可检测基因 +++ + ++ ++ 胃液PCR 可以检测治病基因 +++ + ++ +++ 组织PCR 需要昂贵的质谱仪 ++ - - - 14C-UBT + + ++ + 13C-UBT 尤其适于治疗的复查 + +++ +++ ++ 尿素酶 不能单独用于正规研究 + +++ +++ ++ 细胞学 不能用于临床检诊 ++ ++ ++ + 血清学 获得细菌和可做药敏 +++ ++ + +++ 分离培养 同时可以观察病变 ++ +++ ++ +++ 组织学 备注 技术难度 价廉 快速 侵袭性 方法

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