候选抑癌基因syk抑制乳腺癌的生长和转移-外科学专业论文.docxVIP

————一 ————一 生堡墨登查兰堡主至些堡圭 中英文对照及部分缩略语 Spleen Tyrosine Kinase，Syk 脾源性酪氨酸蛋白激酶 Methylation—specific reverse transcriptase polymerase chain reaction，MSP甲 基化特异性多聚酶联反应 reverse transcriptase polymerase chain reaction，RT-PCR 逆转录多聚酶联反 应 immunohistochemistry 免疫组化 estrogen receptor,ER 雌激素受体 progesterone receptor，PR 孕激素受体 DNA methyltransferase enxyme，DNMT DNA甲基转移酶 5-Aza一2．deoxycytidine，5-aza—CDR 5．氮．2’一脱氧胞苷 2 南京医科大学博士学位论丈候选抑癌基因syk抑制乳腺癌的生长和转移 南京医科大学博士学位论丈 候选抑癌基因syk抑制乳腺癌的生长和转移 中文摘要 背景脾酪氨酸蛋白激酶(Spleen Tyrosine Kinase，Syk)是一种广泛表达在 造血细胞、淋巴细胞、成纤维细胞、』缸管内皮细胞上的蛋白质酪氨酸激酶， 在细胞信号传导中起着重要的作用。Syk基因首先是从猪脾cDNA文库中分 离出来的，所以称脾酪氨酸蛋白激酶，分子量为72KD，位于人类第9号染 色体氏臂q22上。 Syk基因被认为是候选抑癌基因，对肿瘤的生长和转移有抑制作用，我 们对Syk基因在乳腺癌生长、转移过程中的作用进行了探讨。 1．候选抑癌基因syk mRNA在乳腺癌中的表达检测及其临床意义 目的探索候选抑癌基因Syk mRNA的表达对乳腺癌生成及转移的影响。 方法用RT-PCR检测六株乳腺癌细胞株Syk mRNA，半定量RT-PCR检测 40例乳腺癌标本、正常乳腺组织及其1 5例良性乳房纤维瘤组织中SykmRNA 的表达。 结果6株乳腺癌细胞株有3株Syk基因表达缺失，所有正常乳腺组织都有 Syk基因的表达，而40例乳腺癌组织中只有9例表达，正常乳腺与乳腺癌组 织中Syk基因表达率差异有显著性(x2=47．4，P0．05)，且乳腺癌组织中Syk mRNA含量比正常乳腺组织显著降低(卢3．4，P0．05)。有淋巴结转移的18 例乳腺癌组织中， 1例有Syk基因表达，无淋巴结转移的22例乳腺癌病人 中有8例检测到Syk mRNA的表达，有淋巴结转移的乳腺癌Syk mRNA的表 达率和表达水平显著降低(x2=3．77，P0．05，t=2．74，P0．05)。 结论Syk基因的表达对乳腺癌的生长及转移可能起抑制作用。 2．syk基因蛋白表达与乳腺癌关系的研究目的探索Syk蛋白的表达与乳腺生物学特征的关系 2．syk基因蛋白表达与乳腺癌关系的研究 目的探索Syk蛋白的表达与乳腺生物学特征的关系 方法采用S-P免疫组化法检测40例乳腺癌组织、癌旁组织中Syk蛋白、 HER．2、ER、PR、p53蛋白表达情况，并分析其与病理特征的关系。 结果40例乳腺癌邻近正常组织中有36例Syk蛋白阳性表达，40例乳腺癌 组织中有6例阳性，正常乳腺组织Syk阳性率高于乳腺癌组织(x2=44．5， P0．05 o有淋巴结转移的18例乳腺癌组织没有检测到Syk蛋白的阳性表达， 22例无淋巴结转移的乳腺癌组织有6例Syk蛋白阳性表达，无淋巴结转移的 乳腺癌组织Syk蛋白阳性表达率显著高于有淋巴结转移组(x2=5．63，P0．05)。 Syk蛋白表达与HER．2、p53蛋白表达呈负相关，与ER、PR蛋白表达无相 关性(X2=2．14，P0．05；X2=0．05，P0．os)。 结论 Syk蛋白的表达抑制了乳腺癌的生长及转移，syk蛋白的表达是p53 依赖性的。 3．候选抑癌基因Syk启动子甲基化与乳腺癌发生转移的关系 目的探讨Syk基因启动子甲基化与乳腺癌发生、转移过程的关系。 方法采用甲基化特异性PCR(MSP)检测六株乳腺癌细胞株、40例乳腺癌组 织、癌旁组织及15例乳房纤维瘤组织中Syk基因启动子甲基化情况，并分 析Syk基因启动子甲基化情况与乳腺癌的生成、转移的关系。 结果6株乳腺癌细胞株中有3株检测有Syk基因启动子甲基化。40例乳腺 癌旁组织及乳房纤维瘤组织未发现有Syk基因启动子的甲基化，40例癌组织 中有17例检测到Syk基因启动子的甲基化，癌组织Syk基因肩动子甲基化 率显著增高(X2=21．3，P0．05)。有淋巴结转移的18例乳腺癌组织中，有14 4 例Syk基因启动子甲基化，有淋巴结转移的Syk基因启动子甲基化显著高丁 例Syk基因启动子甲基化，有淋巴结转移的Syk基