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细菌培养的必要性： 技术层面的需要 政策层面的需要 法律层面的需要 2006年6月1日卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》正式实施。对不同等级的医院应开展的检验项目和设备作出了明确的规定。 * 三级医院： * 二级医院： * 生物安全要求： 目前抗菌药物的应用现状： 人类用： 医院（20%） 有疑问的应用 （50%） 社区（80%） 20%--50% 农业用： 治疗性（20%） 高度怀疑 （50%） 预防促生长（80%） 40%--80% 耐药形势严峻，耐药株和多重耐药株不断产生 细菌室的标准化 微生物实验室检测系统的建立： 检测系统：（包括仪器试剂方法质控物SOP） * 手工鉴定系统：生物学性状、双歧索引、KB法药敏 * 手工编码鉴定系统：如API staph鉴定系统--- * 半自动细菌鉴定系统：crystal 、 Microscan, ATB * 全自动细菌鉴定及药敏系统：VITEK，BD等。可提供MIC及专家分析结论提示耐药等 * 质控菌株：ATCC25922、25923、27853 微生物实验室检测系统的建立： 房间布局流程分区合理，防鼠虫等符合生物安全要求 设备：基础设备 自动化设备 SOP文件 规范化操作 标本采集和运送的规范条例 培养前标本质量检测规范 标本接种规范 细菌鉴定流程规范 细菌药物敏感试验规范基本 实验室质量控制 无菌体液细菌报告规范 日常工作中存在的问题 * 阳性率低 * 标本污染 * 结果不准 * 出报告时间过长 调查四 是否做到了三级报告制 泌尿标本采集的规范 采集后的标本应立即送检(*30分) 采集时间:多数药物从尿道排泄,所以不管用哪种方法都应在用药前采集,应采集早晨第一次的尿. 标本管不应含防腐剂和消毒剂 采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的外阴和男性的外生殖器包括皮内,然后用清水冲洗 长期留置尿导管的患者应在更换新管时留取尿标本. 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿. 分泌物采集规范 对开放性病灶的采集:如眼结膜脓性分泌物,扁桃体,外耳道,手术后切口,导管治疗感染,痔管内脓液,生殖道分泌物等均属于开放性病灶,应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染物,也可取感染部位下的组织送检# 闭锁性脓肿:如淋巴脓肿,肺脓肿,肝脓肿,腹腔脓肿,盆腔脓肿等,对封闭的脓肿采用穿刺或引流的方法采样,应在用药前采集,应注意脓液的气味,性状,颜色注意厌氧菌存在的可能.不能及时送检应用输送培养基. 便标本采集规范 1.采集时间:腹泻患者应在用药前急性期采集;沙门菌感染,肠热症应在2周内采;厌氧菌出现症状即采集. 2.采集方法:自然排便者可用小木棒挑取有脓血和黏液的部位的粪便2—3克,如液状粪便取絮状物盛于无菌的,密封的,不吸水的,容器内或直接盛于保存液中;对不易获得粪便患者及幼儿,可用直肠拭子采集后置保存液或输送培养基中送检. 痰标本的采集和运送条例 标本采集时间：用抗生素前 采集方法：自然咳痰：必须用清水漱口3次，应包括咽喉部，立即用力咳出痰，于灭菌容器中或输送培养基中。 支气管镜或支气管毛刷：由医生采集，建议直接种入培养基。 厌培养标本采集规范条例 痰标本的厌氧培养标本采集：必须用气管穿刺法获得痰液，从口腔吐出的痰标本不能用于厌氧培养 尿标本的厌氧培养标本采集：耻骨上膀胱穿刺获得尿标本可用于厌氧菌培养 便标本厌氧培养标本采集：可用排出的便做厌氧培养但应少与空气接触。 血液及骨髓标本采集运送规范 采血时间：尽可能在用抗生素前，心内膜炎例外 采血量：至少应采一套2瓶，分需氧和厌氧。两瓶血量不少于16-20毫升，先将10毫升注入需氧瓶，再将剩余血采血注入厌氧瓶 采血方法：不要与血气和血沉标本一起采血；不应在血注入培养瓶前换针头；不应在静脉导管或静脉留置口采血。 血液及骨髓标本采集运送规范 采血间隔:如果第一次采集2套(4瓶)血培养标本,在以后的2-5天内不必再采血,但心内膜炎和导管相关性败血症除外.必要时行多部位静脉采血 儿童:采血量应是总血量的1%. 延迟培养瓶的处理:延迟培养瓶不要放冰箱,应放置常温,尽早送往临床细菌室 其他无菌体液的采集运送规范 无菌的采集是培养成功的首要因素 采集的标本应立即送至细菌室,如脑膜炎双球菌有自溶酶,离体后会迅速自溶.肺炎链球菌和流感嗜血杆菌离体后极易死亡. 延迟送检后一定不能放冰箱,如肺炎链球菌和流感嗜血杆菌等对温度敏感的细菌在冰箱会很快死亡. 痰培养标本培养前的规范 * 实验室在接种前必须作痰涂片革兰染色,当在低倍镜下白细胞数小于10个每视野,上皮细胞大于25个每视野时应作为不合格的培养标本; * 当白细胞数小于10个