分子生物学课不件第21讲.pptVIP

3，S21-引发酶-σ亚基操纵元mRNA二级结构对基因寿命的影响（图8-18） （1） S21-引发酶-σ亚基操纵元结构（P304） （2）引发酶部分mRNA的降解 （3） S21基因和σ亚基编码区的mRNA的降解 三、蛋白质合成的自体调控 1， RF2对自身mRNA翻译的控制 （1）RF2 mRNA结构 （2）RF2mRNA的翻译 （3）移框窗口 2，核糖体蛋白质合成的自体调控 （1） E coli基因表达机构的蛋白质及其基因的操纵元 A，蛋白质种类 B，操纵元数目 C，操纵元中不同基因表达的差异性 （2）核糖体蛋白质合成的自体调控 A，有自体调控作用的核糖体蛋白的特点 B，核糖体蛋白质合成的自体调控作用（图8－33） C，同一个操纵元中不同基因的表达调控 四、严谨反应 （一）严谨反应 1，定义 2，生理变化 （二）严谨反应的触发器及报警信号 1，触发器 2，报警信号 3，严谨反应相关的基因 4，报警信号的作用机制 第八节 DNA序列重排对基因转录的调控 一、沙门氏菌的相（phase) 1，细菌的相与鞭毛蛋白的关系 2，相变 二、决定沙门氏菌相的因素 1，H1，H2基因的位置 2，H2－rh1转录单元的作用（图8－36） （1）H2－rh1转录单元 （2）rh1基因产物 （3）H2－rh1转录单元的表达对相的影响 3， H2－rh1转录单元的表达调控（图8－37） （1） 995bp的可倒位序列 （2） hin基因产物的功能 三、相变的生物学意义 第九章 真核生物基因表达的调控 第一节 概述 一、真核生物基因调控的特点 1，基因及染色体DNA的特点 2，真核生物基因表达有多层次的调控 （1）DNA水平的调控 （2）转录水平的调控 （3）转录后水平的调控 （4）翻译水平的调控 3，基因表达随细胞类型、发育阶段和环境的变化而异 二、活跃基因表达数目的估算 1， RNA饱和杂交试验原理 2，例子 三、基因表达的不同水平：丰富mRNA和稀少mRNA （一） mRNA复杂度的测定：RNA驱动的动力学杂交试验分析 1，基本步骤（图9－2） 2， mRNA复杂长度的计算 3，例子：鸡输卵管mRNA驱动的动力学杂交试验 （1）对照：鸡卵清蛋白mRNA Rot1/2：0.0008 长度：2000 （2）鸡输卵管中各mRNA组分的复杂长度 组分Ⅰ 组分II 组分III Rot1/2 0.0015 0.04 30 比例 50% 15% 35% 实际Rot1/2 0.00075 0.006 10.5 复杂长度（nt） 2000 15000 mRNA种类 1 7-8 13000 （二）mRNA丰富度的计算 1，计算公式 2，丰富mRNA和稀少mRNA（复杂mRNA） （1）丰富mRNA（优势mRNA）：细胞中少数几种高丰度（数千至数万拷贝）的mRNA （2）稀少mRNA（复杂mRNA）：细胞中占mRNA种类绝大多数（数千至上万种）的低丰度（大多在10拷贝以下）的mRNA 四、持家基因和奢侈基因 （一）确定组织特异活跃基因数目的方法 1，加性饱和杂交试验 （1）通过饱和杂交试验分别确定2种不同组织中各自活跃基因表达的数目 如：鸡肝脏mRNA由2.05%的非重复DNA编码（17000个），输卵管mRNA由1.8%的非重复DNA编码（ 15000个） （2）通过饱和杂交试验确定2种组织中活跃基因表达的总数 如：鸡肝脏和输卵管的mRNA由2.4 %的非重复DNA编码 （3）确定2种组织各自特异表达及共同表达的基因 如：鸡肝脏特异的mRNA数目为：17000×（2.4-1.8) / 2.05 ≈5000 输卵管特异的mRNA数目为：15000×（2.4-2.05) / 1.8 ≈3000 2，另一种测定不同组织中活性基因重叠情况的方法 （1）过量的第一种组织mRNA与非重复DNA的杂交试验 分离mDNA（能与第一种组织mRNA杂交的非重复DNA） 分离无效DNA（不能与第一种组织mRNA杂交的非重复DNA，null DNA） （2）过量的第二种组织mRNA与mDNA的杂交 确定两种组织共有的基因（能与第一种组织mRNA杂交的mDNA ） （3）过量的第二种组织mRNA与无效DNA的杂交 确定第二种组织不同于第一种组织的基因（能与第二种组织mRNA杂交的无效DNA ） （二）持家基因和奢侈基因 1，持家基因（house keeping genes) 约占某一类型细胞总mRNA的90％ 约有10000种 2，奢侈基因 (luxury ge