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从紫膜的结构浅谈其广泛的应用前景 作者：古洪元 上海交通大学生命科学技术学院研究生 学号：1080809066 摘要 1975 年Henderson首次解析得到了分辨率为 0 ．7 纳米的细菌视紫红质的晶格 结构，这为我们进一步研究紫膜的结构合功能特异性奠定了坚实的基础。其后的研究 发现，紫膜中行使质子泵功能的是整合膜蛋白菌紫质。由光能驱动，菌紫质可逆的发 + + 生全—反式和顺式的循环变化，将膜内的H 不断地转运到膜外，产生H 电化学梯度差。 之前对这种梯度差的应用并不是很充分。随着分子生物学和功能基因组学的发展，这 种潜在的能源得到了广泛的应用。本文将从菌紫质的来源、结构等发面阐述其广泛的 应用领域。揭示其对人类的卓越贡献。 关键词 菌紫质， 质子泵， H+ 电化学梯度差， 结构 功能 1，紫膜是什么？ 紫膜的产生菌嗜盐菌是一种极端微生物。在厌氧光照条件下培养嗜盐菌时，产生一种菌 视紫素嵌入细胞质膜中，成为紫膜，使菌体呈现紫色。紫膜主要由脂质和蛋白质两种成分构 成。脂质占 25%，蛋白质占 75%。其中蛋白质只含一种，即细菌视紫红质。菌紫质含 248 个氨基酸残基，其中 70%为疏水性氨基酸残基。菌紫质是嗜盐菌紫膜上发现的一种具有光 功能的蛋白质。是迄今为止所知道的最简单的光驱动质子泵。菌紫质具有突出的光致变色性 能、瞬态光电相应性能和非线性光学性能。是制造纳米生物器件最理想的材料之一。 嗜盐菌的菌视紫素可强烈吸收 570nm处的绿色光谱区。菌视紫素的视觉色基(发色团) 通常以一种全—反式结构存在于膜内侧，它可被激发并随着光吸收暂时转换成顺式状态。这 种转型作用的结果使H+转移到膜的外面，随着菌紫质分子的松弛和黑暗时吸收细胞质中的 + 质子，顺式状态又转换为更为稳定的全—反式异构体。再次的光吸收又被激发，转移H 。 如此循环形成质膜上的H+质子梯度差，产生电化学电势。菌体利用这种电化学电势在ATP酶 的催化下，进行 ATP 的合成，为菌体储存生命活动所需要的能量。 紫膜是极端嗜盐古生菌细胞结构的一大特征，除了具有光合作用外，还具有光能转换特 性，如将太阳能转换为电能。紫膜分子结构在光作用下的变构现象，也有可能作为生物计算 机的光开关、存储器等。 2，紫膜的分离 紫膜是从嗜盐菌中分离出来的。这就涉及到嗜盐菌的培养和其上紫膜的分离。 在 4000mL 培养基中接入大剂量 RM 菌种(按纯紫膜计算大约为 5mg) 加入少量去泡剂 通气 240L/h，40℃，培养 48h；当溶液变得稍微浑浊时，离心收集菌体， 添加新鲜培养基继续培养。重复此过程两次 减少通气量至 160L/h，继续培养 2-3 天至菌体呈紫红色 图 1 嗜盐菌的培养方法 以上方法类似于工业微生物中的连续发酵法，采用了大量接种，不断添加新鲜培养基的 方法。由于陈旧的培养基不断被更新，其中抑制微生物生长的代谢产物浓度不断降低；同时， 相对细菌数量大大累积，最终合成的紫膜量也相应增加。 在整个培养过程中，光照和通气是最为关键的因素。光照可以诱导嗜盐菌的生长，通气 量决定着嗜盐菌以何种方式进行 ATP 的合成。较高的氧浓度可以加速嗜盐菌的分裂增值， 而低氧压力又有助于紫膜的形成。这给我们启示：若能摸索出一个最适的氧浓度，既有利于 菌体的生长，又有利于紫膜的形成，将大大提高紫膜的产量。 经图 1 培养方法培养得到的紫膜产生菌按如下图 2 的方法得到紫膜。该方法提纯的紫 膜其A280/A568值大约为 1.9 –2.0。280nm为蛋白质在紫外区的吸收峰，568nm为菌紫质分