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陕西省地方标准编制说明
----番茄品种抗灰霉病鉴定技术规范
一、工作简况:包括任务来源、协作单位、主要工作过程、起草组组成成员及其所做的主要工作等;
“番茄品种抗灰霉病鉴定技术规范”的研究来源于西北农林科技大学承担的国家公益性行业(农业)科研专项(201303025)和陕西省科技攻关(2013K01-46)等项目。
该技术规范的研究主要包括番茄菜灰霉病病原物的来源、分离和鉴定、田间鉴定圃的设置、室内苗期鉴定方法、田间成株期鉴定方法以及抗性评价等主要工作。主要起草人中,王阳副研究员全面负责该课题的设计和实施,马青教授主要负责灰霉病病原物的分离、鉴定以及室内苗期鉴定方法,宗兆锋教授主要负责田间鉴定圃的设置和田间成株期鉴定方法研究,赵新贝主要负责番茄灰霉病抗性评价研究。
二、标准编制原则和确定标准主要内容:包括技术指标、参数、公式、性能要求、试验方法、检验规则等的依据(包括试验、统计数据);地方标准修订项目还应当列出和原标准主要差异情况;
1.陕西省地方标准编制原则
本标准的编制依据《中华人民共和国标准法》和《地方标准管理办法》的规定进行编制。
2.确定地方标准主要内容
该标准是申请者及其团队多年来从事番茄灰霉病研究与防治总结出来的一套适宜于陕西省各地进行番茄灰霉病鉴定的技术规范。申请人及其团队多年来一直从事番茄抗灰霉病的鉴定工作,鉴定结果可为陕西省番茄抗病育种的审定提供参考。本标准是起草组结合本课题组十几年的番茄灰霉病温室苗期和田间成株期抗性鉴定的经验,同时参考国内相关研究进展而制定的。
(1)适用范围
本标准规定了番茄品种抗灰霉病鉴定技术的术语和定义、病原物制备、抗病性评价标准及鉴定报告等内容。
本标准适用于陕西省番茄生产品种、新育成品种、区域试验品种、亲本及中间材料的灰霉病抗性鉴定和抗性评价。
(2)规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
DB11 T 285-2005 保护地番茄灰霉病测报调查规范
GB/T 17980.28-2000 农药田间药效试验准则
(3) 术语与定义
下列术语和定义适用于本标准。
= 1 \* GB3 ①番茄灰霉病 Tomato grey mould
由半知菌类Botrytis cinerea Pers.引起的番茄真菌病害。
= 2 \* GB3 ②侵染型 Infection type
根据寄主植物侵染型有无和反应型程度来划分的病斑类型。
(4)病原物
①病原物来源
在陕西番茄种植区采集灰霉病病株,从发病植株叶片的典型病斑上进行分离纯化,形态学鉴定确认为Botrytis cinerea Pers.,PDA平板扩繁,经致病性测定后,试管斜面培养,4℃保存备用。
②灰霉病菌长期保存
在超净工作台上,将灰霉菌菌饼接种到PDA培养基平板上,23℃培养3-4d,然后切取小块长有菌丝的PDA培养基,放在灭菌的蒸馏水中保存,灭菌蒸馏水盛在有螺盖的小玻璃瓶中,-20保存。或将灰霉菌小块菌饼放在30%灭菌甘油中,-80℃
③ 孢子悬浮液的制备
灰霉病菌在PDA平板上黑暗培养7d产孢后,收集孢子,2%的蔗糖溶液配置孢子悬浮液(1×106孢子/ml)。
(5)抗病性鉴定
①抗病性鉴定方法
ⅰ室内苗期抗性鉴定
选取待测番茄品种和感病对照T2-01六叶期幼苗,分别进行孢子悬浮液喷雾接种,用手持喷雾器喷雾,至叶面均匀布满小液滴。接种后在 23℃、相对湿度90 %的黑暗条件下保湿 24 h。每份试材 3 次重复,每重复 10 株。接种 4 d 后调查发病率和严重度,并计算
ⅱ离体叶片抗性鉴定
选取待测番茄和感病对照T2-01六叶期植株第3片复叶,采用孢子悬浮液点滴接种。在小叶中心近轴处用移液器加5μL孢子悬浮液,以2%蔗糖溶液作对照。将接种后的叶片置于直径9cm的培养皿内,封口膜封口。在23℃、相对湿度90%的黑暗条件下培养24h后进行光照培养,光照时间为12 h/d,光照强度为3 000lx。接种4d 后计算病情指数。每份试材3次重复,每重复10株,每株接种3片小叶。
ⅲ离体果实抗性鉴定
取大小一致的青果,在果实侧面用消毒针尖扎3mm深的孔,接种5 μL孢子悬浮液,以灭菌蒸馏水5μL作对照。将果实置于湿度90%的器皿中保湿,20℃黑暗条件下保存,接种第4d测量病斑面积,计算病斑扩展速率和相对病斑扩展速率。每份试材3次重复,每重复5个果,每果扎2个孔。
ⅳ成株期鉴定病圃鉴定
鉴定圃设置在人工营造的有利于番茄灰霉病发病的抗性鉴定圃或病害常发区域。田间鉴定病圃的栽培条件(品种、土壤类型及施肥)须均匀一致,且符合科学的农业实践(GAP),设立保护区。
在鉴定病圃中采用高垄栽培,每待
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