基因芯片检测转基因植物方法学的建立-微电子与固体电子学专业论文.docxVIP

基因芯片检测转基因植物方法学的建立高秀丽(微电子与崮体电予学) 基因芯片检测转基因植物方法学的建立 高秀丽(微电子与崮体电予学) 指导老师：赵建龙杨剑波 摘要 转基因技术的发展给人们的生活带来了更多的机遇。通过生物技术呵使品种改 良如产最增加、品质提高、抗性(抗虫、抗旱、抗病、抗逆)增强等，但200多年 来的工业文明告诉人类，科学是一把双刃剑，在给人类带来无限益处的同时，也引 起了人们的担忧。从转基因技术诞生至今，人类一直进行着有关转基因技术的食品 ：安全、环境风险、生态安全、柏：会伦理道德以及国际经济利政治安全等一系列问题 的思考及争论。因此，转基因植物的检测的愈发重要，只有准确地检测转基因食品， ／t‘能有效的对j二市的转基因食品进行监控。 本论文建立了用基因芯片检洲转基因植物的方法，利用基因芯片信息量大的特 点，能同时对转基因植物中的启动子、终止子、报告基因进行检测。和PCR这些传 统榆测转基因植物的方法相比，具有灵敏度高、特异性高，操作简便、快速，自动化 程度高及结果准确率高等特点。 和以往基于杂交检测原理的基因芯』}不同，我们探讨了基于引物延伸原理的芯 J}检测方法。利用此种基因芯片对转基因样品进行检测，能够实现样品扩增、标记、 榆测的一体化，大大缩短了检测时间，也为目前基因芯片中丈片段待测样品和小片 段探针杂交的技术难题提供了一种新的思路。我们利用此种芯片实现了对质粒 pCAMBIAl301中所含的四个基因GUS、35S启动子、hpt、aadA的特异性同步检测。 我们还讨论了利用微测序基因芯片来检测转基冈植物，基于微测序检测原理的 基凼芯片，不仅通过探针和目的片段杂交时的热稳定性来区分样品，还利用了卟A 聚合酶的特异性延伸来对样品进行检测，因此理论上具有更高的特异性。我们初步 利用质粒pCAMBIAl301中GUS、35S启动子、hpt、aadA基因的PCR产物作为榆洲的 对象，实现对这几个基囡的特异性检测，为以后直接利用质粒或基因组DNA作为检 测对象奠定了基础。 通过本论文的研究表明，基因芯片是一种可行有效的转基因植物检测方法，具 有广阔的应用前景。 关键词：转基因植物检测，基因芯片，引物延伸芯片，微测序芯片 The The establ ishment of detecting transgenic plant by gene——chip GAo Xiuli Directed by Jianlong Zhao，Jianbo Yang Abstract The transgenic technique brings more opportunities to our life，which makes the improvement of varieties，the increase of output，the enhancement of quality and resistant． However more than 200 years industry civilization tells as science is‘a double—blade sword’．While bringing the infinite profit to human beings，science also arouses people’S worries．Since the naissance of transgenic technique people were all along thinking and arguing about its food security,environment risk，ecology security and social ethics morals．So detecting technique of transgenic plato became more and more important．Only when we detect transgenic plant exactly Call we monitor the commercial transgenic food effectively． Our research has established an effective detection method of transgenic plant． Using genechip which has the merit of abandant information，we can detect promoter， terminator,reporter gene which occur in transgenic plants．Compared with ordinary det