原位杂交空2修改稿.pptVIP

v.显示 1、碱性磷酸酶标记抗地高辛抗体 Fab片段（1：1000）室温下孵 育1h。 2、0.05 mol/L PBS (pH 7.2)冲洗 4次，每次5 min。 3、TSM2冲洗2次，每次5 min。 4、TSM2冲洗2次，每次5 min。 5、NBT和BCIP显色液中显色3h(室温 )。 6、0.05 mol/L PBS冲洗2次，每次5 min 7、脱水、透明、封片。 （三）吸收试验 将无标记探针先同特异性与之互补的DNA或RNA预杂交，然后再进行原位杂交，结果应为阴性。 三、杂交反应对照 （一）空白试验 在进行原位杂交时，将杂交液中省去标记探针，结果应为阴性。这是一项简便而有意义的阴性对照。 （二）杂交前用核酸酶预处理标本 根据靶核酸是DNA或RNA，对被检测的标本先用DNA酶或RNA酶进行预处理以消化被检测的核酸，然后再进行原位杂交。与未经DNA酶或RNA酶预处理的标本相比，如果杂交信号明显减弱，便证明标记探针与未经酶预处理标本中的DNA或RNA之间有杂交体形成。 四、显示系统对照 （一）放射自显影显示系统对照 阳性对照是将浸渍乳胶的空白片在光线下曝光后显影，阳性结果证明乳胶及显影过程工作正常。 阴性对照是将空白片浸乳胶后不经曝光便与原位杂交标本一起进行显影，结果应为阴性。 如果阴性对照照片上有较多的银