miR27a调控比格犬上颌窦黏膜干细胞成骨分化的研究-口腔疾病防治.PDF

·484 · 口腔疾病防治 2018年8月 第26卷 第8期 ［DOI］10.12016/j.issn.2096⁃1456.2018.08.002 ·基础研究 · miR⁃27a调控比格犬上颌窦黏膜干细胞成骨分化 的研究 1 2 3 2 2 2 张静 ， 朱双喜 ， 荣琼 ， 彭伟 ， 李祥 ， 陈松龄 1.广州中医药大学祈福医院口腔科，广东 广州（511495）; 2. 中山大学附属第一医院口腔科，广东 广州 （510080）; 3.云南省第一人民医院口腔科、昆明理工大学附属医院口腔科，云南 昆明（650032） 【摘要】 目的 检测miR⁃27a在犬上颌窦黏膜干细胞（maxillarysinusmembranestemcells,MSMSCs）成骨分化 过程中的表达情况，探讨其在犬上颌窦黏膜干细胞成骨分化中的作用。方法 体外培养犬上颌窦黏膜干细 胞，经成骨诱导培养后，RT⁃PCR检测miR⁃27a的表达。犬上颌窦黏膜干细胞转染pre⁃miR⁃27a和anti⁃miR⁃27a 后，RT⁃PCR检测Runt相关转录因子2（runt⁃relatedtranscriptionfactor 2,Runx2）和骨桥蛋白（osteopontin，OPN） mRNA的表达，Westernblot检测Runx2和OPN蛋白的表达。转染pre⁃miR⁃27a的细胞成骨诱导培养后与Bio⁃ Oss复合，建立裸鼠皮下异位成骨模型，观察miR⁃27a体内抑制成骨情况。结果 犬上颌窦黏膜干细胞经成骨 诱导培养后，miR⁃27a表达量降低。miR⁃27a 1d(t ＝3.795，P＝0.023)，3 d(t ＝4.493，P＝0.011)，7 d(t ＝ D D D 11.591，P 0.001)，14d(t ＝12.542，P 0.001)，21d(t ＝5.621，P＝0.008)的表达量均高于0d组。转染pre⁃miR⁃ D D 27a的犬上颌窦黏膜干细胞经成骨诱导培养后，与阴性对照组相比，成骨标志物 Runx2mRNA(t＝4.923，P＝ 0.007)及蛋白(t＝4.425，P＝0.008)和OPNmRNA(t＝5.253，P＝0.006)及蛋白(t＝5.132，P＝0.006)表达量明显降 低。相反，转染anti⁃miR⁃27a的犬上颌窦黏膜干细胞经成骨诱导培养后，Runx2(t＝3.925，P＝0.013)和OPN(t＝ 3.712，P ＝0.019)mRNA表达量比阴性对照组明显升高。单纯培养细胞与Bio⁃Oss复合后，在裸鼠皮下有成骨 表现；但转染pre⁃miR⁃27a的犬上颌窦黏膜干细胞与Bio⁃Oss复合后，犬上颌窦黏膜干细胞在裸鼠皮下异位新 骨形成面积减少(t＝7.219，P＝0.002)。结论 miR⁃27a负向调控上颌窦黏膜干细胞成骨分化。 【关键词】 miR⁃27a； 上颌窦黏膜干细胞； 成骨分化； Runt相关转录因子2； 骨桥蛋白 【中图分类号】 R782.13 【文献标识码】 A 【文章编号】 2096⁃1456（2018）08⁃0484⁃07 【引用著录格式】 张静，朱双喜，荣琼，等.miR⁃27a调控犬上颌窦黏膜干细胞成骨分化的研究[J]. 口腔疾病防 治，2018，26(8)：484⁃490. RoleofmiR⁃27aintheosteogenicdifferentiationofbeaglemaxillarysinusmembranestemcells ZHANG 1 2 3 2 2 2 Jing,ZHUShuangxi,RONGQiong,PENGWei,LIXiang,CHENSongling. 1.Department