原创力文档- 1、本文档共55页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
蛋白酶活力字测定1
蛋白酶活力测定 一、概述 1．什么是酶？ 2．影响酶催化反应的因素 3．什么是酶的活力? 4．测定意义 5. 测定方法 生物催化剂 特殊催化功能的蛋白质 底物浓度 pH 温度 时间 V Vmax 底物浓度C C0 饱和浓度 OD pH pH最适 酶的分类 酸性蛋白酶 3350 pH最适=2～4； 7401 pH最适=3.0 中性蛋白酶 1398 pH最适=7～7.5； 166 pH最适=7～8 碱性蛋白酶 2709 pH最适=9～11； 209 pH最适=9.5～11 OD T（℃） T最适 3350：T最适 ：45℃-47℃ 40℃以下稳定 1398：T最适 ：30℃-37℃（pH：6.0-6.5 ） T最适 ：40℃-50℃（pH：7.0-7.5 ） 2709：T最适 ：45℃-55℃ 40℃以下稳定。 Q（反应物的消耗量或生成物的生成量) t0 t 结 论 酶催化反应 在反应初速度时间内 最适温度 最适pH 饱合底物浓度 在最大活力处比较 测定意义 生皮蛋白质 测定方法 乙醇滴定法、甲醛滴定法等 Folin-酚法，紫外分光光度法，残氮量测定法等等。 Gross法、明胶粘度下降法、凝乳作用法 酸性蛋白酶活性，还可以根据胰蛋白酶原激活作用的大小来表示。 二、测定原理 福林试剂，在碱性情况下极不稳定。可被酚类化合物还原，而呈蓝色反应。由于蛋白质或水解产物中含有酚基的氨基酸(酪氨酸、色氨酸等)也呈这个反应，因此可以利用这个原理来测定蛋白酶活性的强弱。 1．酶催化反应 2.显色反应 福林试剂 + 酪氨酸 OH- HO — —CH2—CH—COOH 还原性 NH2 显色剂 Na2WO4 Na2MoO4 H2O H3PO4 福林试剂→ HCL Li2SO4 Br2 3．朗伯-比尔定律及其应用 E —— 吸光度 A —— 消光值 OD —— 光密度 E = K·Ｃ·L = lg（I0/I） = K′· C 透光率 T = I I0 朗伯-比尔定律的应用 [X] → [RX]
文档评论（0）