人教版酵母册细胞的固定1.ppt

* * 专题4 酶的研究与应用 * 酵母细胞的固定化 一、课题目标 2．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。 1．说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理。 一、酶的应用： 优点：催化效率高、低耗能、低污染 缺点： 1、对环境条件敏感、易失活； 2、难回收、不能再次利用、成本高、 3、反应后，酶混在产物中，影响产品质量 如何解决？ 基础知识 （一）固定化酶的应用实例 1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例 （1）高果糖浆的生产需要 酶 葡萄糖异构 （2）葡萄糖异构酶的优点 稳定性好、可以持续发挥作用 （3）在生产中直接使用酶有什么缺点？ 酶溶解于葡萄糖溶液后，无法回收，造成浪费 2.固定化酶的反应柱示意图 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。 3、固定化酶技术的优点和缺点 优点: 1.既能与反应物接触，又能与产物分离； 提高产品质量 2.可反复利用酶，降低了生产成本。 缺点: 无法催化一系列酶促反应 如何解决？ 4、固定化细胞技术的优点和缺点 优点: 成本低，操作更容易； 固定了一系列酶。 缺点: 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降等。 （二）固定化细胞技术 1.将酶或细胞固定化的方法 将酶（或细胞）包埋在细微网格里 将酶（或细胞）相互连接起来 将酶（或细胞）吸附在载体表面上 包埋法 化学结合法 吸附法 2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别 联系：应用相同，都能催化某些反应 区别： 1）固定化细胞技术操作容易，成本低，容易回收； 2）固定化细胞技术对酶活性影响更小； 3）固定化细胞固定的一系列酶； 4）由于大分子难以通过细胞膜，因此固定化细胞的应用有一定的限制 3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等， 其共同的特点是不溶于水的多孔性载体 （一）制备固定化酵母细胞 实验操作 1、酵母细胞的活化 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2 3、配制海藻酸钠的溶液 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5、固定化酵母细胞 1、酵母细胞的活化 在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短，一般需要0.5～1 h，教师需要提前做好准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 （一）制备固定化酵母细胞 2、配制物质的量浓度为0.05mol/L 的CaCl2 刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便使其形成稳定的结构。 （一）制备固定化酵母细胞 （一）制备固定化酵母细胞 3、配制海藻酸钠的溶液 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。 （一）制备固定化酵母细胞 4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 注意：将融化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞。 5、固定化酵母细胞 （一）制备固定化酵母细胞 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少 结果分析与评价： 1、观察凝胶珠的颜色和形状 淡黄色 如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形， 则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。 （二）用固定化酵母细胞发酵 实验操作 1、将固定化的酵母细胞（凝胶珠）用蒸馏水冲洗2到3次。 2、将150ml质量分数为10%的葡萄糖溶液转移到200ml的锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于25摄氏度下发酵24h。 3、观察发酵的葡萄糖溶液 利用固定化酵母细胞发酵产生酒精，可以 看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。